| 抗Caspase-3核酶的体外制备与活性鉴定 |
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| 引用本文： | 徐人欢,周霞秋,谢青. 抗Caspase-3核酶的体外制备与活性鉴定[J]. 中华肝脏病杂志, 2000, 8(6): 361-363 |
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| 作者姓名： | 徐人欢 周霞秋 谢青 |
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| 作者单位： | 徐人欢（中国科学院上海生物化学研究所200031） 周霞秋（中国科学院上海生物化学研究所200031） 谢青（中国科学院上海生物化学研究所200031） 金由辛（中国科学院上海生物化学研究所200031） 廖丹（中国科学院上海生物化学研究所200031） |
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| 基金项目： | 上海市高等学校青年科学基金（98QN60）；中国科学院重大项目基金（KJ951-B1-610） |
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| 摘 要： | ![]()
目的 研究针对大鼠凋亡基因Caspase-3设计的核酶（Rz107和Rz544）的体外转录，切割及活性鉴定。方法 大鼠Caspase-3基因的PCR片段克隆于T载体T7启动子下游，32^P标记的体外转录物作为靶RNA。设计合成并克隆针对大鼠Caspase-3 mRNA的核酶（Rz107和Rz544），32^P标记转录，核酶与靶RNA按一定比例进行体外切割实验。结果 Rz107在37℃有活性。在一定温度范围内，其切割效率随温度升高而升高，最适温度为50℃。其米氏常数（km）为14.13mol/L，酶催化反应速度常数（kcat）为2.31/min。而Rz544则无切割活力。结论 体外制备的Rz107具有良好的特异催化切割活性，它有望通过切割（Caspase-3)而抑制凋亡发生，可发展为新一代抗肝炎症的核酸药物。
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| 关 键 词： | RNA 活性鉴定 抗Caspase－3S核酸 肝细胞凋亡 |
| 修稿时间： | 1999-10-25 |
Preparation and identification of hammerhead ribozyme in vitro against rat caspase-3 mRNA fragment |
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| XU Renhuan,ZHOU Xiaqiu,XIE Qing,et al.. Preparation and identification of hammerhead ribozyme in vitro against rat caspase-3 mRNA fragment[J]. Chinese journal of hepatology, 2000, 8(6): 361-363 |
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| Authors: | XU Renhuan ZHOU Xiaqiu XIE Qing et al. |
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| Affiliation: | Department of Infectious Diseases, Ruijin Hospital of Shanghai Second Medical University, Shanghai 200025, China. |
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| Abstract: | ![]()
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