脉络宁局部灌注对挤压伤综合征模型猪Wnt/β-catenin和Notch信号通路的影响

目的探讨脉络宁局部灌注对挤压伤综合征模型猪Wnt/β-连接蛋白（β-catenin）和Notch通路的影响。方法24只巴马小型猪随机分为正常对照组、模型组、常规灌注组和脉络宁灌注组,每组6只。除正常对照组外,其余各组建立挤压伤模型,建模结束后模型组即刻恢复血供,常规灌注组和脉络宁灌注组建模前处理,建模后分别给予常规灌注和脉络宁灌注1h后恢复自身血供。各组恢复自身血供4h后,采用苏木素-伊红（HE）染色检测骨骼肌组织形态;透射电镜观察骨骼肌超微结构;ELISA法检测血清中白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平;RT-qPCR检测骨骼肌组织中血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶2（MMP-2）mRNA水平;Westernblot检测骨骼肌组织中β-catenin、Delta样配体4（Dll4）和Notch的蛋白水平。结果HE结果显示模型组骨骼肌肌纤维排列紊乱,肌核肿胀或固缩明显,肌膜皱缩,血管破裂、肿胀,肌间质水肿,炎症细胞浸润明显;电镜结果显示模型组肌丝排列紊乱、出现溶解,肌纤维I带、A线和Z线部分丧失,内质网、线粒体和肌核肿胀明显,出现大量的核聚集和核内移。常规灌注组略轻于模型组。脉络宁灌注组HE显示骨骼肌形态基本正常,肌纤维较常规灌溉组排列整齐,肌膜皱缩或肿胀现象不明显,血管基本恢复正常;电镜结果显示肌纤维I带、A线和Z线清晰可见且规则,细胞核排列整齐。与正常对照组相比,模型组组织肿胀、血管破损比例和Z线异常百分率,血清中IL-1β和TNF-α水平,骨骼肌组织中VEGF和MMP-2的mRNA水平,β-catenin核蛋白/β-catenin总蛋白、Dll4和Notch蛋白水平升高（P<0.05）;与模型组相比,常规灌注组组织肿胀、血管破损比例和Z线异常百分率,血清中IL-1β和TNF-α水平,骨骼肌组织中MMP-2的mRNA水平,核β-catenin/β-catenin总蛋白、Dll4、Notch的蛋白水平及脉络宁灌注组血清中的IL-1β和TNF-α水平,骨骼肌组织中VEGF和MMP-2的mRNA水平,β-catenin核蛋白/β-catenin总蛋白、Dll4、Notch的蛋白水平均降低（P<0.05）;与常规灌注组相比,脉络宁灌注组组织肿胀、血管破损比例和Z线异常百分率,血清中的TNF-α水平,骨骼肌组织中VEGF和MMP-2的mRNA水平,核β-catenin/β-catenin总蛋白、Dll4、Notch蛋白水平降低（P<0.05）。结论脉络宁局部灌注可抑制Wnt/β-catenin和Notch通路,缓解炎症和血管损伤,从而实现对挤压伤综合征的保护。