缺氧对H9C2心肌细胞中miR-19a-3p表达的研究

目的检测大鼠H9C2心肌细胞缺氧后细胞水平和培养液中循环微小RNA(miRNA,miR)-19a-3p的表达,并探讨其与可能靶基因低密度脂蛋白受体相关蛋白2(LRP2)的关系。方法对H9C2心肌细胞进行缺氧(37℃,5% CO_2,1% O_2)0、4、8、12、16、20、24h处理,采用荧光实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测其在不同时间点细胞水平和培养液中循环miR-19a-3p的表达水平,使用ELISA、qRT-PCR、Western Blot检测LRP2在培养液和细胞中mRNA和蛋白表达。结果 H9C2细胞培养液中miR-19a-3p的表达在缺氧0、4、8、12、16h差异无统计学意义(P0.05),在缺氧20h与24h时,H9C2细胞培养液中miR-19a-3p的表达与缺氧0h比较,明显高表达(P0.05);在缺氧20h与24h时,H9C2细胞中miR-19a-3p的表达与缺氧0h比较,明显下降(P0.05);H9C2细胞培养液中LRP2的表达在缺氧16h后表达明显升高,缺氧16h(675.2±42.4)ng/mL,n=3]、缺氧20h(979.4±204.2)ng/mL,n=3]和缺氧24h(1 456.0±363.6)ng/mL,n=3]较0h(245.0±10.84)ng/mL,n=3]明显升高(P0.05);H9C2细胞中LRP2mRNA表达水平在缺氧16h后表达明显升高,缺氧16h(0.000 503±0.000 100)ng/mL,n=3]、缺氧20h(0.001 303±0.000 090)ng/mL,n=3]和缺氧24h(0.001 617±0.000 110)ng/mL,n=3]较0h(0.000 139 4±0.000 060 0)ng/mL,n=3]明显升高(P0.05);20h(0.235 000±0.003 427)ng/mL,n=3]与24h(0.535 000±0.003 427)ng/mL,n=3]LRP2蛋白表达与0h(0.140 10±0.018 21)ng/mL,n=3]比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论 miR-19a-3p可能参与大鼠H9C2心肌细胞的缺氧坏死过程,并且可能通过调控LRP2而发挥作用。