α-倒捻子素在MDCK细胞模型中的跨膜转运机制

目的:建立α-倒捻子素在培养液中高效液相色谱专属分析方法,采用MDCK细胞结合Millicell系统建立MDCK细胞模型,考察α-倒捻子素的跨膜转运过程。方法:采用HPLC-UV法,厚朴酚为内标,色谱柱RP zobax SB-C18(150 mm×4.60 mm,5μm),波长312 nm,甲醇和水梯度洗脱;不同时间点采集顶侧、细胞层及基底侧样本,考察其在膜两侧及细胞层的分布;采用维拉帕米及β-葡醛酸苷酶处理分别考察P-糖蛋白(p-gp)抑制剂和II相代谢酶对药物吸收的影响。结果:该方法在0.08~10.00μg·m L-1范围内线性良好;给药6 h后,顶侧、细胞层及基底侧的药物分别占总药量的(78.2±4.5)%,(19.6±4.2)%和(2.2±1.3)%,顶侧和基底侧药物II相代谢明显,而细胞内药物代谢相对较少且药物结合紧密,给药3 h后细胞摄取达峰值;维拉帕米对α-倒捻子素吸收无影响。结论:预测α-倒捻子素具有口服生物利用度低及II相代谢明显等特点。