| 带有6肽组氨酸的HBV S/S145真核表达载体的构建及应用 |
| |
| 引用本文： | 覃莉,田拥军,张正茂,郝友华,王宝菊,杨东亮.带有6肽组氨酸的HBV S/S145真核表达载体的构建及应用[J].华中医学杂志,2008,32(2):148-150. |
| |
| 作者姓名： | 覃莉 田拥军 张正茂 郝友华 王宝菊 杨东亮 |
| |
| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉,430030 |
| |
| 摘 要： | 目的 构建稳定表达带有6肽组氨酸的HBV S/S145蛋白的真核载体.方法 应用PCR技术及体外基因重组技术,将S基因和nt587突变的S基因插入带有his-tag的pxF2RH载体中,扩增6个组氨酸和S/S145基因,最后与经Nhe I、Sal I双酶切的线性载体pCI-neo连接,构建成带有6肽组氨酸的稳定表达S/S145的真核表达载体(简称pCI-his-SY/S145).用脂质体转染的方法将质粒转至人宫颈癌细胞,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中抗原的分泌情况.用Western-blot方法检测细胞中外膜蛋白的表达情况.结果 真核表达载体pCI-his-SY/S145的测序结果与预期大小一致.ELISA方法可检测到细胞上清中的野生型表面抗原,但检测到145突变抗原表达水平低.应用Western-blot方法可以同时检测到野生型和G145R突变的外膜蛋白表达.结论 带有his-tag的重组质粒pCI-his-S/S145可以在Hela细胞中成功表达融合蛋白,且组氨酸可作为检测蛋白的标志.
|
| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 变异 抗原表位标记 |
| 修稿时间： | 2007年10月30 |
Constuction of eukaryotic expression vector carring HBV S/S145 antigen by epitope tagging method and its application |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
