基于网络药理学研究荔枝叶的抗炎机制及实验验证

目的：采用网络药理学分析方法研究荔枝叶的抗炎作用机制，并进行体外细胞实验验证。方法：通过查阅文献查找荔枝叶化学成分，借助中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）及SwissADME五项原则筛选出活性成分；基于Pubchem数据库、Swiss Target Prediction数据库预测各成分靶点；并利用Disgenet数据库获取炎症基因；采用Venny2.1.0数据库获得成分靶点与炎症基因的交集靶点作为潜在抗炎靶点，并将其输入STRING 11.0数据库获取蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络图；使用DAVID 6.8数据库对抗炎靶点基因进行基因本体（GO）富集分析和京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析；采用Cytoscape 3.8.0软件构建荔枝叶“活性成分-抗炎靶点-通路”网络图。通过CCK-8法检测荔枝叶醇提物对RAW264.7细胞活性的影响；酶联免疫吸附试验法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的含量；蛋白质印迹检测环氧合酶-2（COX-2)蛋白表达。结果：从荔枝叶中筛选到9个活性成分，潜在抗炎靶点47个，127种GO生物功能，68条KEGG信号通路，涉及肿瘤坏死因子（TNF）信号通路、缺氧诱导因子1（HIF-1）信号通路等与炎症相关通路。细胞实验表明荔枝叶醇提物浓度为12.5，25，50 μg/mL对小鼠腹腔巨噬细胞（RAW264.7）没有毒性，可降低脂多糖诱导RAW264.7细胞导致的TNF-α、IL-6的释放量，对COX-2蛋白的表达也有抑制作用。结论：构建的“成分-靶点-通路”网络结构图揭示了荔枝叶通过多成分、多靶点、多通路协同作用达到抗炎作用，为进一步阐明荔枝叶抗炎作用机制提供理论依据。

Study on Anti-Inflammatory Mechanism and Experimental Verification of Leaves of Litchi chinensis Sonn.Based on Network Pharmacology