应用DNA条形码ITS2序列对市售药材黄柏的鉴定研究 |
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作者姓名: | 汤欢 向丽 赵莎 孙伟 叶萌 |
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作者单位: | 四川农业大学林学院 成都 611130;中国中医科学院中药研究所/中药鉴定与安全性检测评估北京市重点实验室 北京 100700,中国中医科学院中药研究所/中药鉴定与安全性检测评估北京市重点实验室 北京 100700,中国中药公司 北京 102600,中国中医科学院中药研究所/中药鉴定与安全性检测评估北京市重点实验室 北京 100700,四川农业大学林学院 成都 611130 |
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基金项目: | 科学技术部国家重大新药创制项目(2013ZX09301307):基于中医临床转化的中药创新品种研发,负责人:陈士林。 |
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摘 要: | 目的:应用DNA条形码ITS2序列鉴定市售黄柏药材及其混伪品,保障药材质量及用药安全。方法:对90份药材及其基原植物样品进行DNA提取,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增ITS2序列并进行双向测序,运用CodonCode Aligner V3.7.1对测序峰图进行校对拼接,去除低质量区和引物区,得到ITS2序列,运用MEGA 6.1对序列进行比对分析,基于K2P遗传距离构建系统聚类树。结果:90份实验样品均能提取到DNA,其DNA经PCR扩增、测序,序列拼接剪切后均能得到高质量ITS2序列。川黄柏和关黄柏基原物种黄皮树和黄檗的种内最大K2P遗传距离分别为0.018和0.004,均远小于其与混伪品的种间最小K2P遗传距离(0.051和0.056);NJ树结果显示川黄柏和关黄柏聚为一支,其混伪品各自聚为一支。结论:基于ITS2序列的DNA条形码技术可准确、有效地鉴定市售黄柏药材及其混伪品,为其市场监管及用药安全提供了一种高效的技术方法。
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关 键 词: | DNA条形码 ITS2序列 黄柏 混伪品 |
收稿时间: | 2015-11-29 |
修稿时间: | 2015-12-07 |
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