探索蛋白酶体抑制剂MG-132对小鼠早期胚胎发育的影响

目的探讨泛素-蛋白酶体抑制剂MG-132对小鼠早期胚胎发育细胞周期的影响。方法通过体外受精的方法,分别收集受精后12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、72 h、84 h、96 h的胚胎(12 hpi、24 hpi、36 hpi、48 hpi、60 hpi、72 hpi、84 hpi、96 hpi),通过Western Blotting验证在检测12 hpi时总蛋白泛素化水平最高,以此为基准设置不同浓度以及时间梯度,确定MG-132引起2-细胞发育阻滞和延迟的最适浓度和处理时间,最终确定MG-132浓度1 mmol/L,在14~18 hpi作用4 h可以引起2-细胞发育阻滞和延迟。通过Edu检测、免疫荧光实验,观察分析MG-132是否会引起早期胚胎发育细胞周期改变。结果用1 mmol/L MG-132,在14~18 hpi处理4 h可以引起早期胚胎发育细胞周期延迟。结论 MG-132作为泛素-蛋白酶体抑制剂,可以抑制胚胎发育中蛋白质的降解,引起早期胚胎发育细胞周期进程受抑,致使胚胎发育阻滞在G2/M期。