猪卵母细胞OPS玻璃化冷冻保存的研究

猪卵母细胞由于脂肪含量高,对低温敏感,相较其他动物卵母细胞的冷冻保存更加困难,因此在种质的保护保存、胚胎工程研究产生极大的阻碍。本试验研究了猪卵母细胞的OPS玻璃化冷冻保存方法,研究乙二醇、甘油和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为冷冻保护剂,对比不同的浓度梯度和两种冷冻保护剂联合使用对冷冻效果的影响。研究未经体外成熟培养和不同时间体外成熟培养的猪卵母细胞的冷冻保存效果。对比改良优化的OPS玻璃化冷冻方法和传统的程序化冷冻方法的保存效果。实验表明,体外成熟12h(GV期)的猪卵母细胞用乙二醇添加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)进行玻璃化冷冻,解冻后体外成熟率、细胞的形态正常率与未经体外成熟的的卵母细胞相比差异显著,与成熟48h(MII期)卵母细胞相比差异不显著。但卵裂率和桑椹胚囊胚率体外成熟12h(GV期)的猪卵母细胞用乙二醇添加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为冷的保护剂组要好于其他组。