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| 人FL基因高效真核表达载体的构建及其在COS—7细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 王冠军,马俐君,李梁,裴雪涛. 人FL基因高效真核表达载体的构建及其在COS—7细胞中的表达[J]. 中国免疫学杂志, 2001, 17(6): 305-308 |
| 作者姓名： | 王冠军 马俐君 李梁 裴雪涛 |
| 作者单位： | 1. 白求恩医科大学第一临床医学院血液肿瘤科, 2. 北京军事医学科学院输血研究所, |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973)项目(G1999053903)资助 |
| 摘 要： | 目的：构建人FL真核表达载体－pIRS1neo/hFL，观察其在COS－7细胞 中的表达。方法：采用RT－PCR方法自人白血病细胞系TF－1中克隆可溶型FL（Flt3-ligand)cDNA片段，测序鉴定正确后，插入真核表达载体-pIRES1 neo中的EcoR Ⅰ和BamHI位点，构建hFL真核表达载体－pIRES1neo/hFL。脂质体介质法将其转染COS－7细胞，72h以RT－PCR检测转染细胞中外源hFL基因的转录、ELISA法及脐血CD34^ 细胞增殖实验测定转染细胞上清上hFL的含量和活性。结果：酶切鉴定表明成功构建了重组真核表达载体－pIRES1neo/hFL；外源hFL基因能在转染细胞中有效转录；ELISA法测得72h后培养上清中的hFL含量为每24小时251ng/10^6 cells，并且分泌的hFL具有良好的生物学活性。结论：构建hFL真核表达载体在COS－7细胞中具有良好的表达活性。 |
| 关 键 词： | FL 真核表达载体 COS－7细胞 表达活性 生物学活性 专职抗原递呈细胞 APC |
| 文章编号： | 1000-484X(2001)06-0305-04 |
Construction of a human Flt3-ligand gene-containing eukaryotic expressing vectorand its expression in COS-7 cells |
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| Abstract: | |
| Keywords: | hFL Eukaryotic expression vector COS 7 cells |
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