原核细胞阳性克隆的筛选 |
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引用本文: | 汪渊,陈厚早,储兵,张素梅,卜丽佳,王杰,王雪,朱华庆,周青,桂淑玉.原核细胞阳性克隆的筛选[J].安徽医科大学学报,2003,38(6):486-488,485. |
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作者姓名: | 汪渊 陈厚早 储兵 张素梅 卜丽佳 王杰 王雪 朱华庆 周青 桂淑玉 |
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作者单位: | 1. 安徽医科大学分子生物学实验室和生物化学教研室;安徽省基因研究重点实验室,合肥,230032 2. 安徽医科大学附属医院呼吸内科,合肥,230022 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(编号 :3 9870 3 2 4),国家教委优秀年轻教师研究基金,安徽省自然科学基金(编号 :0 10 43 716和990 44 312),安徽省教育厅教学研究项目(编号 :JYXM2 0 0 3 12 9),安徽省学术带头人研究基金资助项目 |
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摘 要: | 基因重组的连接反应物通过转化产生大量转化菌 ,只有通过高敏感和高特异的筛选方法才能挑选和鉴定出含有正确目的基因的重组体。此类方法的基本原理基于 :① 196 7年 ,Ullmann等发现大肠杆菌带有完整的近操纵基因区段 β D半乳糖甘酶阴性的突变体和LacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体之间互补 ,实现对 5 溴 4 氯 3 吲哚 β D半乳糖(X gal)分解显色形成蓝色菌落 ;② 1975年 ,Grun stein和Hogness介绍一种在硝酸纤维素膜上原位裂解细菌菌落并释放DNA非共价结合于滤膜的方法 ,结合于滤膜的DNA可与相应的放射性标记的核酸探针进行杂…
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关 键 词: | 原核细胞阳性 克隆 筛选 遗传学 基因重组 |
文章编号: | 1000-1492(2003)06-0486-04 |
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