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| 细菌CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因定点突变对酶活性的影响研究 | |
| 引用本文： | 陈大斌,谢勇恩,凌保东,周岐新,张翔,雷军. 细菌CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因定点突变对酶活性的影响研究[J]. 中国抗生素杂志, 2008, 33(4): 232-235 |
| 作者姓名： | 陈大斌 谢勇恩 凌保东 周岐新 张翔 雷军 |
| 作者单位： | 1. 重庆医科大学药理学教研室,重庆,400016;川北医学院药物研究所,南充,637007 2. 川北医学院药物研究所,南充,637007 3. 重庆医科大学药理学教研室,重庆,400016 |
| 基金项目： | 四川省自然科学基金 , 四川省教育厅重点实验室专项基金 |
| 摘 要： | 目的构建CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因突变体，比较突变前、后酶活性的变化，进一步阐明酶的分子结构特征和生化特性。方法利用重叠延伸PCR定点诱变技术将CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因Ser240（丝氨酸）AGC定点突变为Gly240（甘氨酸）GGC，分别构建CTX-M型酶的原核重组表达载体及其突变表达载体，重组载体经酶切鉴定和DNA测序鉴定后，转化大肠埃希菌JM109，比较突变前、后酶活性的改变。结果酶切鉴定和DNA测序鉴定表明CTX-M型酶的原核重组表达载体及其突变表达载体构建成功，转化大肠埃希菌JM109后，发现含野生型CTX-M基因的重组菌其酶活性与来源菌株相近，而含突变型CTX-M基因的重组菌未检测到酶活性。结论Ser240对于维持CTX-M型超广谱β-内酰胺酶活性具有重要作用。 |
| 关 键 词： | 超广谱β-内酰胺酶 CTX-M基因 定点突变 酶活性 细菌 超广谱 内酰胺酶基因 基因定点突变 酶活性 影响 研究 mutant enzyme activity Study 作用 检测 突变型 菌株 来源 重组菌 野生型 发现 表达载体构建 结果 |
| 文章编号： | 1001-8689(2008)04-0232-03 |
| 修稿时间： | 2008-01-22 |
Study on the enzyme activity of S240G mutant of extended-spectrum β-Iactamase CTX-M produced by site-directed mutagenesis |
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| Chen Da-bin,Xie Yong-en,Ling Bao-dong,Zhou Qi-xin,Zhang Xiang,Lei Jun. Study on the enzyme activity of S240G mutant of extended-spectrum β-Iactamase CTX-M produced by site-directed mutagenesis[J]. Chinese Journal of Antibiotics, 2008, 33(4): 232-235 | |
| Authors: | Chen Da-bin Xie Yong-en Ling Bao-dong Zhou Qi-xin Zhang Xiang Lei Jun |
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