| 电穿孔转染悬浮细胞条件的优化 |
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| 引用本文： | 蔡磊,李艳,寞科峰,张巍,丁睿,赵青川. 电穿孔转染悬浮细胞条件的优化[J]. 中国医科大学学报, 2008, 37(4) |
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| 作者姓名： | 蔡磊 李艳 寞科峰 张巍 丁睿 赵青川 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学,西京医院,肝胆外科,西安,710033
2. 第四军医大学,西京医院,呼吸内科,西安,710033 |
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| 摘 要： | 目的以RNA依赖性腺嘌呤脱氨酶(ADAR1)为靶基因优化悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞的电穿孔转染条件。方法通过控制电压、温度、细胞状态等转染条件,采用不同条件组合将靶向ADAR1的siRNA导入悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞,用倒置显微镜观察、细胞计数、台盼蓝拒染试验来计算siRNA序列转染率和细胞存活率。结果小鼠原代淋巴细胞在400V,40μs条件下可获得最大转染率,约为30.6%;良好的细胞状态以及低温条件可获得更好的转染效果。结论电穿孔转染法是一种高效的基因转染方法,通过优化其转染条件,可以提高其对悬浮细胞的转染率。
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| 关 键 词： | 电穿孔转染 悬浮细胞 基因转染 优化 |
O ptmiza tion of E lectroporation Param eters for Cell Culture in Suspension |
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| CAI Lei,LI Yan,DOU Ke-feng,ZHANG Wei,DING Rui,ZHAO Qing-chuan. O ptmiza tion of E lectroporation Param eters for Cell Culture in Suspension[J]. Journal of China Medical University, 2008, 37(4) |
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| Authors: | CAI Lei LI Yan DOU Ke-feng ZHANG Wei DING Rui ZHAO Qing-chuan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | electroporation cell cultured in suspension gene transfection optimization |
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