| 人HNF1α真核表达载体的构建及表达 |
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| 作者姓名： | 娄桂予 陈敏 陈彬 陈健 李渝萍 周度金 |
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| 作者单位： | 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，第三军医大学科研创新基金，解放军医学科研项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建人肝细胞核因子-1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)真核表达载体,在体外表达并检测.方法 提取HepG2总RNA,用RT-PCR方法制备HNF1α cDNA,进行T-A 克隆.Hind Ⅲ/EcoR Ⅰ双酶切测序正确的重组质粒,回收HNF1α cDNA片段,将其亚克隆于pcDNA3.1( )载体的多克隆位点内.将构建好的真核表达质粒用脂质体法转染HepG2细胞,RT-PCR和免疫印迹法检测HNF1α的表达. 结果正确构建了pcDNA3.1( )-HNF1α重组载体,并且在转染该质粒的HepG2细胞中检测出了HNF1α的高表达. 结论成功地构建了人HNF1α真核表达载体,其可以在体外表达.
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| 关 键 词： | HNF1α基因 真核细胞 表达载体 转染 |
| 文章编号： | 1000-5404（2007）13-1273-03 |
| 修稿时间： | 2006-04-242007-01-19 |
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