| 转录因子Kaiso真核表达载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 曹红一,唐娜,林旭勇,张迪,苗原,王恩华,戴顺东. 转录因子Kaiso真核表达载体的构建及鉴定[J]. 中国医科大学学报, 2012, 41(2): 112-114,119 |
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| 作者姓名： | 曹红一 唐娜 林旭勇 张迪 苗原 王恩华 戴顺东 |
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| 作者单位： | 中国医科大学基础医学院病理学教研室,附属第一医院病理科,沈阳110001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(81071717,81000942) |
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| 摘 要： | 目的 构建并鉴定转录因子Kaiso的表达质粒pEGFP-Kaiso.方法 采用PCR的方法扩增pCS2-Kaiso中人Kaiso的全长序列,克隆至载体pEGFP-N1中,构建重组质粒pEGFP-Kaiso,以酶切及基因测序方法鉴定重组质粒的准确性.利用LipofectamineTM 2000将重组质粒转染至肺癌细胞系A549,24h后荧光显微镜观察绿色荧光信号,48 h后Western blot鉴定Kaiso蛋白表达变化.结果 限制性双酶切及DNA测序分析结果显示插入的DNA片段长度约为2 022 bp,与预期Kaiso基因片段大小相同.转染pEGFP-Kaiso重组质粒后,荧光显微镜观察到明确的绿色荧光蛋白(GFP)的绿色荧光信号,Western blot证实转染pEGFP-Kaiso质粒后的Kaiso蛋白表达量显著上调(P＜0.05).结论 成功构建了人Kaiso基因真核表达载体,为深入研究Kaiso的生物学功能提供了有力的实验工具.
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| 关 键 词： | Kaiso 基因克隆 真核表达载体 |
Construction and Identification of Kaiso Eukaryotic Expression Vector |
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| CAO Hong-yi , TANG Na , LIN Xu-yong , ZHANG Di , MIAO Yuan , WANG En-hua , DAI Shun-dong. Construction and Identification of Kaiso Eukaryotic Expression Vector[J]. Journal of China Medical University, 2012, 41(2): 112-114,119 |
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| Authors: | CAO Hong-yi TANG Na LIN Xu-yong ZHANG Di MIAO Yuan WANG En-hua DAI Shun-dong |
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| Affiliation: | (Department of Pathology,College of Basic Medical Sciences,Department of Pathology,The First Hospital,China Medical University,Shenyang 110001,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Kaiso gene cloning eukaryotic expression vector |
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