RNA干扰抑制Fas基因的表达对小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3的影响 |
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引用本文: | 张春兵,高峰,张明顺,腾凤猛. RNA干扰抑制Fas基因的表达对小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3的影响[J]. 临床检验杂志, 2013, 31(6): 438-441 |
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作者姓名: | 张春兵 高峰 张明顺 腾凤猛 |
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作者单位: | 南京中医药大学附属江苏省中医院检验科,南京210029;南京中医药大学附属江苏省中医院检验科,南京210029;南京医科大学微生物学和免疫学教研室,南京210029;南京中医药大学附属江苏省中医院检验科,南京210029 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81171659);江苏省自然科学基金(BE2010768)。 |
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摘 要: | 摘要:目的:用RNA干扰(RNAi)技术抑制小鼠Fas基因表达,观察其对脑微血管内皮细胞bEnd.3增殖及FADD-FLIP-TRAF-NF-κB信号传导途径的影响, 为后续FasL低剂量兴奋效应研究提供实验基础。 方法:设计合成靶向小鼠Fas基因的小干扰RNA(siRNA)片段,用脂质体包埋转染bEnd.3细胞;CCK-8法检测细胞增殖;RT-PCR检测bEnd.3细胞FasmRNA的表达情况;western blot 检测 Fas、FADD、FLIP、TRAF蛋白表达水平。 结果:CCK-8法检测显示,Fas-siRNA组细胞增殖水平与空白对照组比较,无统计学差异(t=1.805,P>0.05);RT-PCR 结果表明,与空白组的Fas mRNA表达水平比较,Fas-228-、Fas-310-、Fas-427-、Fas-891-siRNA组mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(F=123.127,P<0.05);western blot显示,Fas-siRNA组与空白对照组Fas蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(t=12.101,P<0.01);Fas-siRNA组FADD、FLIP、TRAF蛋白相对表达水平与空白对照组比较,表达均下调(t=28.315、17.563、8.903,P<0.05)。 结论:Fas-siRNA能有效封闭Fas基因的表达,抑制Fas下游信号FADD、FLIP、TRAF蛋白表达。
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关 键 词: | Fas基因;RNA干扰;细胞增殖 |
收稿时间: | 2013-03-20 |
修稿时间: | 2013-05-17 |
Effect of silencing Fas expression by RNA interference on mice brain microvascular endothelial cell line bEnd.3 |
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Abstract: | |
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Keywords: | Fas gene RNA interference cell proliferation |
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