| 电穿孔法转染人端粒酶逆转录酶至许旺细胞的研究 |
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| 引用本文： | 张诚,程飚,出晓军,王会仁,陈峥嵘. 电穿孔法转染人端粒酶逆转录酶至许旺细胞的研究[J]. 中华显微外科杂志, 2010, 33(3). DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-2036.2010.03.017 |
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| 作者姓名： | 张诚 程飚 出晓军 王会仁 陈峥嵘 |
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| 作者单位： | 复旦大学附属中山医院骨科,上海,200032 |
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| 基金项目： | 2006复旦青年骨干，上海市卫生局科研基金，973课题基金赞助 |
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| 摘 要： | 目的 利用电穿孔技术,将人端粒酶催化亚基(hTERT)转染至SD大鼠许旺细胞,观察及检测外源性hTERT在许旺细胞内表达及对许旺细胞寿命及增殖能力的影响.方法 从食管癌组织中提取hTERT RNA,构建pcDNA3.1-hTERT质粒,利用电穿孔技术,转染许旺细胞,PCR检测hTERTRNA,TRAP-PCR银染法端粒酶活性检测试剂盒检测端粒酶活性,PI-annexin V染色,流式细胞仪测第15代转染及未转染ADSCs细胞凋亡.并且绘制15代转染及未转染细胞传代次数及传代时问曲线.结果 成功构建pcDNA3.1-hTERT质粒.转染后,许旺细胞内hTERT RNA表达,并且TRAP端粒酶活性检测结果为阳性,许旺细胞标志物S100阳性,转染后细胞传代能力较未转染细胞显著增强.结论 成功构建hTERT-许旺细胞.为构建许旺细胞永生化细胞系打下基础.
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| 关 键 词： | 端粒酶 许旺细胞 电穿孔 |
Electransfection with telomerase catalytic subunit(hTERT) enhances proliferative capacity of Schwann cells |
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| ZHANG Cheng,CHENG Biao,CHU Xiao-jun,WANG Hui-ren,CHEN Zheng-rong. Electransfection with telomerase catalytic subunit(hTERT) enhances proliferative capacity of Schwann cells[J]. Chinese Journal of Microsurgery, 2010, 33(3). DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-2036.2010.03.017 |
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| Authors: | ZHANG Cheng CHENG Biao CHU Xiao-jun WANG Hui-ren CHEN Zheng-rong |
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| Keywords: | Telomerase Schwann cells Electransfection |
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