| VEGFR2 D3.4/GST融合蛋白在大肠杆菌的表达、纯化及鉴定 |
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| 引用本文： | 魏玉英,宋朝君,孙元杰,龚玖瑜,金伯泉,杨安钢,杨琨. VEGFR2 D3.4/GST融合蛋白在大肠杆菌的表达、纯化及鉴定[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2008, 24(9) |
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| 作者姓名： | 魏玉英 宋朝君 孙元杰 龚玖瑜 金伯泉 杨安钢 杨琨 |
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| 作者单位： | 第四军医大学免疫学教研室,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的: 构建人血管内皮细胞生长因子II型受体(VEGFR2)胞膜外区第三及第四个免疫球蛋白样结构域与GST融合蛋白VEGFR2 D3.4/GST基因的原核表达载体, 在大肠杆菌中表达并纯化该融合蛋白.方法: 由公司合成VEGFR2胞膜外区第三、第四免疫球蛋白样结构域氨基酸的编码序列, 克隆入原核表达载体pGEX-4T1中GST标签的下游, 构建重组表达载体pGEX4T-VEGFR2D3.4, 将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3) pLysS, IPTG诱导表达VEGFR2 D3.4/GST融合蛋白, 经不同浓度尿素洗脱纯化后, 表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.结果: SDS-PAGE分析表明, 表达产物的相对分子质量(Mr)为46 000, 与理论值相符, 主要以包含体形式存在; 灰度扫描分析融合蛋白的表达量占菌体蛋白总量的38.6%, 纯化产物纯度最高为87.1%, Western blot 证实该蛋白为VEGFR2 D3.4/GST融合蛋白.结论: 利用大肠杆菌表达系统, 获得了较高纯度的包含体形式VEGFR2 D3.4/GST融合蛋白.
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| 关 键 词： | 融合蛋白 原核表达 纯化 |
Prokaryotic expression, purification and identification of VEGFR2 D3.4/GST fusion otein in E.coli |
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| WEI Yu-ying,SONG Chao-jun,SUN Yuan-jie,GONG Jiu-yu,JIN Bo-quan,YANG An-gang,YANG Kun. Prokaryotic expression, purification and identification of VEGFR2 D3.4/GST fusion otein in E.coli[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2008, 24(9) |
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| Authors: | WEI Yu-ying SONG Chao-jun SUN Yuan-jie GONG Jiu-yu JIN Bo-quan YANG An-gang YANG Kun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | VEGFR2 GST |
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