| 根癌农杆菌介导的怀地黄遗传转化研究 |
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| 引用本文： | 王丰青,田云鹤,谢彩侠,杜家方,李烜桢,张留记,何华勤,张重义. 根癌农杆菌介导的怀地黄遗传转化研究[J]. 中草药, 2014, 45(17): 2541-2546 |
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| 作者姓名： | 王丰青 田云鹤 谢彩侠 杜家方 李烜桢 张留记 何华勤 张重义 |
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| 作者单位： | 河南农业大学农学院, 河南 郑州 450002;河南农业大学农学院, 河南 郑州 450002;福建农林大学中药材GAP研究所, 福建 福州 350002;河南中医学院药学院, 河南 郑州 450046;河南农业大学农学院, 河南 郑州 450002;河南农业大学农学院, 河南 郑州 450002;河南省中医药研究院, 河南 郑州 450004;福建农林大学中药材GAP研究所, 福建 福州 350002;河南农业大学农学院, 河南 郑州 450002;福建农林大学中药材GAP研究所, 福建 福州 350002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（81274022，81473299）；中国博士后科学基金资助项目（2013M541977）；河南省教育厅科学技术研究重点资助项目（14A360007） |
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| 摘 要： | 目的研究适于怀地黄Rehmannia glutinosa遗传转化的激素质量浓度和潮霉素质量浓度。方法以地黄无菌苗叶片为外植体,以根癌农杆菌介导的叶盘法进行转化,分析了潮霉素和乙酰丁香酮(AS)对抗性愈伤诱导率和再生芽分化效率的影响。结果潮霉素的质量浓度对抗性愈伤和抗性芽的产生影响很大,影响抗性愈伤诱导的临界质量浓度为9 mg/L,影响抗性芽分化的临界质量浓度为6 mg/L,适宜于进行地黄遗传转化的质量浓度为12 mg/L。侵染培养基和共培养培养基中添加100μmol/L的AS可以极显著提高转化效率。PCR扩增和β-葡萄糖苷酶(GUS)染色结果表明,外源基因成功整合到地黄基因组中。结论建立了有效的怀地黄稳定遗传转化再生体系,为地黄的分子生药学研究和遗传改良奠定基础。
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| 关 键 词： | 地黄 根癌农杆菌 遗传转化 潮霉素 乙酰丁香酮 |
| 收稿时间： | 2014-03-25 |
Studies on genetic transformation of Rehmannia glutinosa mediatedby Agrobacterium tumefaciens |
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| WANG Feng-qing,TIAN Yun-he,XIE Cai-xi,DU Jia-fang,LI Xuan-zhen,ZHANG Liu-ji,HE Hua-qin and ZHANG Zhong-yi. Studies on genetic transformation of Rehmannia glutinosa mediatedby Agrobacterium tumefaciens[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2014, 45(17): 2541-2546 |
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| Authors: | WANG Feng-qing TIAN Yun-he XIE Cai-xi DU Jia-fang LI Xuan-zhen ZHANG Liu-ji HE Hua-qin ZHANG Zhong-yi |
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| Affiliation: | Agronomy College of Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;Agronomy College of Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;Institute of Chinese Crude Drugs GAP, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China;School of Medicine, Henan University of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou 450046, China;Agronomy College of Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;Agronomy College of Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;Henan Province Institute of Chinese Medicine Research, Zhengzhou 450004, China;Institute of Chinese Crude Drugs GAP, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China;Agronomy College of Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;Institute of Chinese Crude Drugs GAP, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rehmannia glutinosa L. Agrobacterium tumefaciens genetic transformation hygromycin acetosyringone |
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