转基因系构建斑马鱼胰岛β-细胞发育模型 |
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作者姓名: | 夏铭 潘雪 王和生 邓敏 金怡 陈漪 李敏燕 孔德明 |
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作者单位: | 贵阳中医学院,贵州贵阳,550001;上海健康科学研究所;上海瑞金医院血液学研究所,上海,200025 |
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基金项目: | 省长课题基金(项目号:黔省专合字,中药现代化 |
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摘 要: | 目的:斑马鱼的发育周期短和胚胎透明等特点使其已经迅速成为研究脊椎动物器官发育和人类疾病的模式生物之一。为研究斑马鱼的胰岛β细胞的发育,构建了胰岛素生殖系转基因斑马鱼系。方法:构建了斑马鱼胰岛素(insulin,INS)启动予与增强型绿色荧光蛋白(eGFP)组成的表达载体,命名为INS:eGFP。通过显微注射的方法将INS:eGFP注射到斑马鱼1-细胞期内的细胞质中,荧光筛选获得生殖系胰岛素转基因斑马鱼,并稳定表达传代。结果:建立生殖系胰岛素转基因斑马鱼,活体动态研究胰岛β细胞发育,原位杂交证实eGFP对胰岛β细胞可靠的示踪性。结论:通过胰岛素转基因斑马鱼的构建,可以直观判断胰岛的发育情况,为研究胰岛的损伤和修复提供了一个简便和直观的新型工具。
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关 键 词: | 斑马鱼 胰岛β细胞 发育 绿色荧光蛋白 胰岛素 |
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