| 摘 要： | 目的:探讨防风石油醚提取物对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖、凋亡、cAMP/PKA/CREB通路及水通道蛋白1(AQP1)表达的影响。方法:通过10μg/mL的TNF-α诱导HFLS-RA细胞建立体外细胞模型,用60、120、240μg/mL的防风石油醚提取物处理后,采用CCK8法测定细胞增殖,TUNEL染色检测细胞凋亡,ELISA法检测上清液中白介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-10和环磷酸腺苷(cAMP)含量,采用RT-PCR法检测磷酸激酶蛋白激酶A(Pka)、cAMP效应元件结合蛋白(Creb)和Aqp1的mRNA表达,Western blot法检测PKA、磷酸化PKA(p-PKA)、CREB和AQP1的蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型对照组细胞增殖能力增加,凋亡减少,上清液IL-1β、IL-6和cAMP的含量升高,Creb和Aqp1的mRNA表达上调,p-PKA、CREB和AQP1的蛋白表达上调及p-PKA/PKA比值显著升高(P<0.01);与模型对照组相比,防风石油醚提取物120、240μg/mL组细胞增殖能力降低,凋亡增加,上清液IL-1β、IL-6和cAMP的含量减少,Creb和Aqp1的mRNA表达下调,p-PKA、CREB和AQP1的蛋白表达下调及p-PKA/PKA比值降低(P<0.05或P<0.01)。结论:防风石油醚提取物可抑制HFLS-RA细胞增殖,促进细胞凋亡,并通过cAMP/PKA/CREB信号通路下调AQP1的表达。
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