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抗TAG-72抗原单链抗体的原核表达及对人肝癌的检测
引用本文:徐宏勇,徐立,李开宗,窦科峰. 抗TAG-72抗原单链抗体的原核表达及对人肝癌的检测[J]. 中国普外基础与临床杂志, 2010, 17(7): 699-702
作者姓名:徐宏勇  徐立  李开宗  窦科峰
作者单位:1. 解放军第451医院肝胆普外科,西安,710054
2. 第四军医大学西京医院全军消化病研究所,西安,710032
3. 第四军医大学西京医院肝胆外科,西安,710032
基金项目:国家自然科学基金,陕西省自然科学基金 
摘    要:
目的探讨抗肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)单链抗体的原核表达及与4种肝癌细胞系和肝癌组织的特异性亲和力。方法将抗TAG-72单链抗体的cDNA片段插入噬菌粒载体pCANTAB5E,获得噬菌粒载体TAG-72-scFv-pCANTAB5E。将后者转化入E.coliHB2151,经β,D异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得抗TAG-72单链抗体蛋白。采用细胞培养及免疫细胞/组织化学方法 ,检测4种肝癌细胞系及石蜡包埋的肝癌组织中TAG-72抗原的表达。结果 SDS-PAGE及Western blot法证实,抗TAG-72单链抗体蛋白分子得以正确表达。抗TAG-72单链抗体可与肝癌细胞系SMMC7721、HepG2和HHCC结合,表明这3种细胞表达了特异性肿瘤抗原;抗TAG-72单链抗体不能结合BEL7402细胞。40例肝癌组织中TAG-72抗原表达阳性率Ⅰ期、Ⅱ~Ⅲ期分别为23.08%(3/13)和62.96%(17/27),在正常肝组织标本中无TAG-72抗原表达,TAG-72抗原在正常肝组织及肝癌组织中表达的差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 TAG-72抗原在肝癌细胞或肝癌组织中有特异性表达,有可能成为判断肝癌的标志物。

关 键 词:肝细胞癌  单链抗体  原核表达  肿瘤相关糖蛋白-72抗原

Prokaryotic Expression of Anti-TAG-72 Single-Chain Variable Fragment and Its Value in Detection of Hepatocellular Carcinoma
XU Hong-yong,XU Li,LI Kai-zong,DOU Ke-feng. Prokaryotic Expression of Anti-TAG-72 Single-Chain Variable Fragment and Its Value in Detection of Hepatocellular Carcinoma[J]. Chinese Journal of Bases and Clinics In General Surgery, 2010, 17(7): 699-702
Authors:XU Hong-yong  XU Li  LI Kai-zong  DOU Ke-feng
Abstract:
Keywords:
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