| 反义DNA甲基化酶3b基因片断真核表达载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 左石,罗剑,刘民锋,徐立宁,董泾青,郭伟,邹声泉. 反义DNA甲基化酶3b基因片断真核表达载体的构建及鉴定[J]. 山东医药, 2005, 45(26): 7-9 |
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| 作者姓名： | 左石 罗剑 刘民锋 徐立宁 董泾青 郭伟 邹声泉 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属同济医院,湖北,武汉,430030;贵阳医学院附属医院;华中科技大学同济医学院附属同济医院,湖北,武汉,430030 |
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| 基金项目： | 国家高科技研究发展计划（863计划） |
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| 摘 要： | 目的构建反义DNA甲基化酶3b（DNMT3b）基因片断真核表达载体，为研究DNMT3b基因功能提供工具。方法根据DNMT3b基因cDNA序列中编码序列设计PCR引物，在上下游引物5′端分别添加XbaⅠ和KpnⅠ酶切位点，RT—PCR从胆管癌细胞QBC-939中获得485bp的DNA片断；将该片断反向插入真核表达载体pcDNA3．1（＋）的多克隆位点，构建反义DNMT3b基因片断真核表达载体，并用PCR、酶切法和DNA测序鉴定。结果PCR鉴定得到467bp特异条带，双酶切鉴定得到471bp片断和5．4kb载体片断，DNA测序说明插入片断序列正确。结论本研究构建的反义DNMT3b基因片断真核表达载体可为进一步研究DNMT3b基因功能提供实验工具。
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| 关 键 词： | DNMT3b 反义技术 表达载体 基因克隆 DNA甲基化 |
| 文章编号： | 1002-266X（2005）26-0007-03 |
| 收稿时间： | 2005-03-11 |
| 修稿时间： | 2005-03-11 |
Construction and indentification of eukaryotic expression vector for antisense DNA methylferase 3b gene {ragment |
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| Zuo Dan;Luo Jian;Liu MinFeng;Xu LiNing;Dong JingQing;Guo Wei;Zou ShengQuan. Construction and indentification of eukaryotic expression vector for antisense DNA methylferase 3b gene {ragment[J]. Shandong Medical Journal, 2005, 45(26): 7-9 |
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| Authors: | Zuo Dan Luo Jian Liu MinFeng Xu LiNing Dong JingQing Guo Wei Zou ShengQuan |
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| Keywords: | DNA methylferase 3b gene antisense technology expression vector gene cloning DNA methylation |
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