TGF-β1通过SMAD非依赖途径诱导胃癌细胞fascin1基因表达的研究

目的 转化生长因子-β1(TGF-β1)对转移相关基因fascin1表达的作用及机制的研究.方法 以胃癌细胞系MKN45为研究对象,采用蛋白质印迹法检测TGF-β1(10 ng/ml)不同作用时间fascin1表达变化.瞬时转染SMAD2和SMAD4的干扰小RNA(siRNA),检测SMAD依赖信号通路在TGF-β1诱导fascin1表达中的作用.应用ERK、JNK和p38信号通路的特异性阻断药,检测SMAD非依赖途径是否参与TGF-β1诱导fascin1表达.结果 TGF-β1(10 ng/ml)作用MKN45细胞24、48 h后,fascin1表达水平明显高于未处理前(0 h),差异有统计学意义(P﹤0.05).RT-PCR和蛋白质印迹瞬时转染SMAD siRNA,SMAD2和SMAD4基因表达下调,而HK几乎不影响SMAD2和SMAD4基因表达.有效地抑制SMAD2和SMAD4表达后,TGF-β1处理对fascin1表达无明显影响.ERK和JNK信号通路的特异性阻断药PD98095和SP600125处理MKN45细胞后,TGF-β1诱导fascin1表达的作用明显降低;而p38信号通路的特异性阻断药SB203580作用前后,TGF-β1对fascin1表达无明显影响.结论TGF-β1可以通过ERK和JNK信号通路调节转移相关基因fascin1的表达.