大鼠脑缺血再灌注损伤后重组人粒细胞集落刺激因子对AKT/caspase9信号通路的影响

目的探讨大鼠脑缺血再灌注损伤后重组人粒细胞集落刺激因子(rh G-CSF)的神经保护作用机制及动态观察p-AKT、caspase9、caspase3蛋白表达变化。方法 74只成年雄性SD大鼠,随机分为四组:假手术组、模型组、治疗组、观察组。采用longa线栓法制作大脑中动脉闭塞再灌注模型(MCAO/R),治疗组于再灌注时及之后每6 h腹腔注射50μg/kg rh G-CSF,模型组和假手术组同时间给予等量的生理盐水,采用longa 5分制法行神经功能缺损评分,光镜下观察缺血区病理学变化,运用免疫组化及Western blot蛋白印迹测定p-AKT、caspase9、caspase3蛋白表达,用原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测细胞凋亡情况。结果 (1)再灌注24 h时,假手术组未见神经功能缺损,模型组神经功能缺损评分(2.25±0.62)高于治疗组(1.58±0.67,P=0.022);免疫组化及Western blot测定p-AKT、caspase9蛋白表达结果一致,与假手术组相比,模型组和治疗组p-AKT、caspase9蛋白表达均增加(P<0.01),治疗组p-AKT蛋白表达较模型组升高(P<0.01),模型组caspase9蛋白表达比治疗组升高(P<0.01);假手术组偶见凋亡细胞,模型组凋亡细胞比例[(31.80±2.91)%]较治疗组[(22.13±2.74)%]显著增多。(2)观察组:再灌注后不同时间点(2 h、6 h、24 h、48 h、72 h)p-AKT、caspase9及caspase3蛋白表达不同。结论 rh G-CSF可能对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能通过AKT/caspase9信号通路减少神经细胞凋亡。

RhG-CSF ameliorates neuronal apoptosis through anti-apoptotic AKT/caspase9 signal pathway following cerebral ischemia/reperfusion injury in rats