软骨终板细胞生物学特性及体外退行性变的机制研究

目的：通过建立猪腰椎间盘软骨终板细胞的培养模型，观察其演变，探讨软骨终板细胞的生物学行为及其影响因素。方法：取长枫杂交猪腰椎间盘软骨终板细胞，于200mL／L胎牛血清的杜尔伯克改良基础培养基(Dulbecco‘‘s modified Eagle’s medium，DMEM)中培养，建立体外软骨终板细胞培养模型。以光镜及苏木精-伊红染色观察其生物学表现；以甲苯胺蓝、番红0、Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色对软骨终板细胞进行鉴定；观察冻存后软骨终板细胞的生物学特性。结果：原代细胞生物学性状最接近体内细胞，多次传代后细胞呈现衰老现象。经染色证实此细胞具有Ⅱ型胶原及蛋白多糖的表达。冻存细胞复苏后，细胞形态及其分化、增殖能力与冻存前基本相同。结论：猪腰椎软骨终板细胞的体外培养模型的建立，可为体外研究软骨终板的退行性变机制提供实验基础。