人肿瘤坏死因子α单链抗体的原核表达和活性分析 |
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引用本文: | 陈萍,邓健蓓,韩骅,药立波,苏成芝,何扬举.人肿瘤坏死因子α单链抗体的原核表达和活性分析[J].第四军医大学学报,2001,22(2):99. |
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作者姓名: | 陈萍 邓健蓓 韩骅 药立波 苏成芝 何扬举 |
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摘 要: | 目的 在大肠杆菌中表达抗人 TNF-α单链抗体 (Sc Fv) ,并分析它的结合活性和中和活性 .方法 在获得抗人 TNF-αE6 Sc Fv的基础上 ,用热诱导载体 p BV2 2 0在大肠杆菌中表达 E6 Sc Fv蛋白 .EL ISA测定抗体的结合活性 ,实时 BIA技术确定亲和常数 ,L 92 9细胞毒试验分析其中和活性 .结果 克隆了抗人 TNF-α E6 Sc Fv基因的热诱导载体 p BV2 2 0在大肠杆菌中 ,经42℃热诱导 ,得到了相对分子质量 (Mr)约为 2 70 0 0的重组蛋白质 ,表达量占菌体总蛋白的 18% .对在大肠杆菌中表达的E6 Sc Fv进行了复性和亲和层析纯化 ,并进一步证…
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