| 地高辛标记斑马鱼cd99l2基因RNA探针的制备 |
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| 引用本文： | 温宗华,张艳,吴自勍,周新华,韩西群,张文清,赵彤. 地高辛标记斑马鱼cd99l2基因RNA探针的制备[J]. 南方医科大学学报, 2010, 30(5): 969 |
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| 作者姓名： | 温宗华 张艳 吴自勍 周新华 韩西群 张文清 赵彤 |
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| 作者单位： | 南方医科大学南方医院病理科,广东,广州,510515;南方医科大学广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东,广州,510515;南方医科大学细胞生物学教研室,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院病理科,广东,广州,510515;南方医科大学广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东,广州,510515 |
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| 摘 要： | 目的 制备用于斑马鱼胚胎早期cd99l2基因时空表达检测的地高辛标记RNA探针.方法 设计引物,构建cd99l2/pGM-T重组质粒,用SacII和SalI分别进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6 RNA聚合酶和T7RNA聚合酶转录合成地反义和正义地高辛标记的RNA探针,用整体原位杂交法检测斑马鱼胚胎早期cd99l2基因的表达.结果 成功构建了cd99l2/pGM-T重组质粒,体外转录获得反义和正义RNA探针,反义探针杂交检测证实cd99l2基因在斑马鱼胚胎早期发育过程中中枢神经系统呈现高表达,正义探针未检测到表达信号.结论 本研究制备的反义cd99l2 RNA探针,兼顾了特异性和敏感性,能有效检测斑马鱼胚胎早期cd99l2基因的定位表达,而正义探针可以作为阴性对照,为进一步探究cd99l2基因在斑马鱼发育过程中的作用机制奠定了基础.
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| 关 键 词： | 斑马鱼 原位杂交 探针 cd99l2 |
Preparation of RNA probe for cd9912 gene of zebrafish labeled with digoxingenin-UTP |
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| WEN Zong-hua,ZHANG Yan,WU Zi-qin,ZHOU Xin-hua,HAN Xi-qun,ZHANG Wen-qing,ZHAO Tong. Preparation of RNA probe for cd9912 gene of zebrafish labeled with digoxingenin-UTP[J]. Journal of Southern Medical University, 2010, 30(5): 969 |
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| Authors: | WEN Zong-hua ZHANG Yan WU Zi-qin ZHOU Xin-hua HAN Xi-qun ZHANG Wen-qing ZHAO Tong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cd99l2 |
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