低氧对人结肠癌细胞HT-29体外侵袭转移潜能的影响

目的 探讨低氧与人结肠癌细胞HT-29恶性转化的关系，检测骨桥蛋白（osteopontin，OPN）、细胞核内核转录因子（NF—κB／p65）表达和MMP-2、MMP-9活性变化，以探索其恶性转化的潜在机制。方法 参照体内肿瘤的氧分压，建立低氧模型。MTT比色试验测定HT-29细胞的异质性黏附能力，Transwell侵袭试验判定其侵袭游走能力；将HT-29细胞低氧处理0、6、12、24、48h，明胶酶谱分析检测分泌的MMP-2、MMP-9活性变化，RT—PCR和Western blot检测OPN mRNA和蛋白表达，提取细胞核蛋白，Western blot检测细胞核内NF—κB／065蛋白表达。结果 低氧诱导24h后，HT-29细胞的异质性黏附能力、侵袭游走能力显著增加。低氧下6h，MMP-2、MMP-9活性无明显变化，随着低氧时间的延长，其活性逐渐显著上调，24h达顶峰，48h与24h无显著性差异。HT-29细胞在低氧的诱导下，其OPN mRNA和蛋白以及细胞核内NF—κB／065蛋白的表达趋势与MMP-2、MMP-9活性变化趋势类同。结论 低氧能诱导HT-29细胞异质性黏附能力、侵袭游走能力显著增加，MMP-2、MMPO活性上调而促使其向恶性表型转化。OPN—NF—κB可能是低氧下继HIF-1之外的另一重要调节途径，该途径与低氧诱导的恶性表型有密切关系。

Effects of moderate hypoxia on invasion and metastasis of colon carcinoma cell line HT-29 in vitro