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癫痫鼠外周血磷酸化S6蛋白检测及意义
Authors:Miao FAN  Shuminin DONG  Xinyi ZOU  Boyuan ZHENG  Yurun HUANG  Jianda WANG  Linghui ZENG
Affiliation:1 浙江大学城市学院医学院, 浙江 杭州 310015 ; 2 浙江大学医学院附属第二医院儿科, 浙江 杭州 310009
Abstract:
目的明确癫痫发作后外周血与脑组织中核糖体磷酸化S6蛋白(P-S6)含量变化的相关性。方法取出生后5~6周龄的C57BL/6小鼠30只和SD大鼠22只,采用红藻氨酸腹腔注射诱导癫痫发作。建立P-S6蛋白的流式细胞术检测方法用以检测小鼠及大鼠外周血中mTOR信号通路下游P-S6蛋白的变化,同时采用蛋白质印迹法检测其脑组织中P-S6的变化。采用Pearson相关性分析法分析脑组织与外周血中P-S6蛋白表达的相关性,并对大鼠外周血P-S6蛋白的表达与癫痫发作等级进行相关性分析。结果癫痫小鼠外周血和脑组织中P-S6的含量明显增高,其表达量分别升高至对照组的(1.49±0.45)倍( P < 0.05)和(2.55±0.66)倍( P < 0.01);外周血中P-S6的阳性表达率和平均荧光强度均明显升高(均 P < 0.01),与脑组织中P-S6蛋白表达具有一致性( r=0.8474, P < 0.01)。大鼠自身致痫前后外周血中P-S6含量明显增加,由14.89±9.75增加至52.35±21.72( P < 0.01),与大鼠脑组织P-S6蛋白表达变化一致( r=0.9385, P < 0.01),且外周血P-S6含量的变化与癫痫发作等级呈正相关。 结论癫痫鼠外周血mTOR信号通路的变化与脑组织中的变化具有良好的相关性,提示通过检测外周血P-S6的表达水平可准确反映脑组织中mTOR信号通路的变化。
Keywords:Epilepsy/pathology, Epilepsy/blood, Brain/anatomy &   histology, Protein kinases/physiology, Phosphoprotein phosphatases/metabolism, Flow cytometry, Disease models, animal
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