| 人釉原蛋白基因转导对人骨髓基质细胞增殖和碱性磷酸酶合成的影响 |
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| 引用本文： | 胡景超,束蓉,宋忠臣,程岚.人釉原蛋白基因转导对人骨髓基质细胞增殖和碱性磷酸酶合成的影响[J].上海交通大学学报(医学版),2011,31(5). |
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| 作者姓名： | 胡景超 束蓉 宋忠臣 程岚 |
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| 作者单位： | 上海交通大学医学院附属第九人民医牙周科上海市口腔医学研究所上海市口腔医学重点实验室,上海,200011 |
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| 摘 要： | 目的 观察慢病毒介导的人釉原蛋白(hAm)基因转导对人骨髓基质细胞(hBMSCs)增殖及细胞成骨分化标志物碱性磷酸酶(ALP)合成的影响.方法 采用RT-PCR技术获取hAm编码基因,扩增产物与携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体质粒(FUGW)连接构建重组慢病毒载体质粒FUAmW,以聚乙烯亚胺(PEI)法三质粒共转染293T细胞组装获取慢病毒,并感染hBMSCs(目的基因转导组);以感染FUGW和未感染病毒的hBMSCs分别作为对照基因转导组和空白对照组.流式细胞仪测定慢病毒感染效率,RT-PCR鉴定细胞hAm表达;MTT比色法检测细胞增殖;慢病毒感染后第7天,倒置相差显微镜观察各组细胞ALP染色情况;感染后第4、7、10天,采用RT-PCR技术检测各组hBMSCs内ALP mRNA表达.结果 目的基因转导组细胞FUAmW的感染效率达40.29%,RT-PCR检测到540 bp的目的基因产物条带;细胞增殖水平显著高于对照基因转导组和空白对照组(P＜0.05);慢病毒感染后第7天,目的基因转导组ALP染色阳性细胞数量明显少于对照基因转导组和空白对照组;感染后第4、7、10天,目的基因转导组细胞ALP mRNA表达显著低于对照基因转导组和空白对照组.结论 导入外源性Am基因能刺激hBMSCs增殖,但细胞内ALP mRNA表达下调.
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| 关 键 词： | 骨髓基质细胞 重组慢病毒载体 釉原蛋白 基因转导 |
Effects of human amelogenin gene transduction on proliferation and synthesis of alkaline phosphatase of human bone marrow stromal cells |
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| HU Jing-chao,SHU Rong,SONG Zhong-chen,CHENG Lan.Effects of human amelogenin gene transduction on proliferation and synthesis of alkaline phosphatase of human bone marrow stromal cells[J].Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science,2011,31(5). |
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| Authors: | HU Jing-chao SHU Rong SONG Zhong-chen CHENG Lan |
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