补阳还五汤通过SIRT1/NF-κB p65信号通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤

目的探讨补阳还五汤（BYHWD）通过调控沉默信息调节因子1（SIRT1）/核因子κBp65（NF-κBp65）炎症信号通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤（CIRI）的作用机制。方法SD大鼠随机分为假手术（sham）组、模型组（MCAO/R组）、BYHWD组、SIRT1抑制剂组（EX527组）和BYHWD+EX527组,每组15只。除sham组外,其余各组均构建大脑中动脉栓塞（MCAO）模型缺血2h再灌注3d并给予药物干预。采用ZeaLonga评分标准进行神经功能缺损评分;TTC染色检测脑梗死体积百分比;HE染色观察脑组织病理学变化;Westernblot检测SIRT1、乙酰化核因子κBp65（AcNF-κBp65）、NF-κBp65、和白细胞介素6（IL-6）蛋白的相对表达量;免疫荧光检测NF-κBp65入核表达水平;免疫组化染色检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达水平。结果与sham组相比,MCAO/R组神经功能学评分升高（P<0.05）;脑梗死体积百分比增加（P<0.05）;缺血侧脑组织皮质区病理损伤严重,神经细胞排列紊乱、细胞核固缩、碎裂;SIRT1蛋白表达减少,AcNF-κBp65/NF-κBp65和IL-6蛋白表达升高（P<0.05）;免疫荧光显示细胞核内NF-κBp65表达增多（P<0.05）;免疫组化显示TNF-α阳性表达升高（P<0.05）。与MCAO/R组相比,BYHWD组神经功能学评分降低（P<0.05）;脑梗死体积百分比减小（P<0.05）;缺血侧脑组织皮质区病理损伤减轻,神经细胞形态有所恢复;SIRT1蛋白表达增加,AcNF-κBp65/NF-κBp65和IL-6蛋白表达减少（P<0.05）;免疫荧光显示细胞核内NF-κBp65表达减少（P<0.05）;免疫组化显示TNF-α阳性表达减少（P<0.05）。SIRT1抑制剂EX527能降低SIRT1的表达,抑制脱乙酰酶活性,削弱了BYHWD通过激活SIRT1后对CIRI产生的上述作用。结论BYHWD可有效减轻大鼠CIRI,激活SIRT1/NF-κBp65信号通路进而抑制炎症反应是其发挥作用的机制之一。