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| 去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因与血管平滑肌细胞增殖(英文) | |
| 引用本文： | 周炜,曹文静,陈莉莉,郭小梅,陈光慧. 去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因与血管平滑肌细胞增殖(英文)[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2010, 14(7). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.07.043 |
| 作者姓名： | 周炜 曹文静 陈莉莉 郭小梅 陈光慧 |
| 作者单位： | 1. 华中科技大学同济医学院附属同济医院,心内科,湖北省,武汉市,430030 2. 华中科技大学同济医学院附属同济医院,检验科,湖北省,武汉市,430030 3. 华中科技大学同济医学院附属同济医院,老年科,湖北省武汉市,430030 4. 美国国家卫生研究所心血管研究室,National,Institutes,of,Health,NIH,9000,Rockville,Pike,Bethesda,Maryland,20892,USA |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
| 摘 要： | 背景:线粒体融合素2基因作用于血管平滑肌细胞Ras蛋白,通过胞外信号调节蛋白激酶1/2通路抑制细胞增殖.线粒体融合素2基因氨基酸序列第442位丝氨酸为蛋白激酶A磷酸化位点,与其磷酸化状态密切相关,能参与其功能调控.目的:观察大鼠线粒体融合素2基因在去除蛋白激酶A磷酸化位点后对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其相关信号通路.方法:利用已构建的携带绿色荧光蛋白基因、线粒体融合素2基因和去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因的3种重组腺病毒,感染大鼠主动脉血管平滑肌细胞,将其传代培养3～10代后以抽签法随机分为4组:①不加干预的对照组.②感染携带绿色荧光蛋白的对照组(Adv-GFP组).⑨感染携带线粒体融合素2基因的实验组(Adv-Mfn2组).④感染携带去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因的实验组(Adv-Mfn2-PKA(△)组).激光共聚焦显微镜观察完整的和去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因在细胞中的定位.Westernblot检测p-ERK1/2表达水平及完整的和去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因在血管平滑肌细胞中的表达.MTT法绘制细胞生长曲线.结果与结论:完整的和去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因在血管平滑肌细胞中均表达蛋白特异性条带.两种基因表达产物都主要分布于线粒体外膜.与对照组和Adv-GFP组相比,Adv-Mfn2组吸光度值在第3,4,5,6天都显著降低(P＜0.01＝,Adv-Mfn2-PKA(△)组吸光度值无明显变化.与对照组和Adv-GFP组相比,Adv-Mfn2组p-ERK1/2表达水平显著降低(P＜0.01＝,Adv-Mfn2-PKA(△)组无明显变化.提示去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因定位于线粒体外膜,对血管平滑肌细胞的增殖无拮抗作用,对胞外信号调节蛋白激酶1/2通路无抑制作用. |
| 关 键 词： | 线粒体融合素2基因 血管平滑肌细胞 增殖:磷酸化 组织工程 |
Effect of mitofusin 2 gene with protein kinase A phosphorylation site deletion on the proliferation of vascular smooth muscle cells |
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| Zhou Wei,Cao Wen-jin,Chen Li-li,Guo Xiao-mei,Chen Guang-hui. Effect of mitofusin 2 gene with protein kinase A phosphorylation site deletion on the proliferation of vascular smooth muscle cells[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2010, 14(7). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.07.043 | |
| Authors: | Zhou Wei Cao Wen-jin Chen Li-li Guo Xiao-mei Chen Guang-hui |
| Affiliation: | Zhou Wei1,Cao Wen-jin2,Chen Li-li3,Guo Xiao-mei1,Chen Guang-hui4 1Department of Cardiology,2Department of Clinical Laboratory,3Department of Geriatrics,Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science , Technology,Wuhan 430030,Hubei Province,China,4National Institute of Health,9000 Rockville Pike Bethesda,Maryl, 20892,USA |
| Abstract: | BACKGROUND: The mitofusin 2 (Mfn2) may affects vascular smooth muscle cell Ras protein and suppress cellular proliferation through inhibition of extracellular signal-regulated protein kinase signaling pathway, which plays an important role in pathogenesis of vascular disorders such as hypertension, atherosclerosis and post-angioplasty restenosis. Mfn-2 gene amino acid sequence of the first 442 serine serves as protein kinase A (PKA) phosphorylation site, which is closely related to its phosphorylation statu... |
| Keywords: | |
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