毒蕈碱胆碱能受体3在小细胞肺癌增殖和迁移中的调节作用

目的:研究毒蕈碱胆碱能受体3(M3R)在人小细胞肺癌(SCLC)中的表达及其作用。方法:体外培养人SCLC细胞株SBC3和H82,RT-PCR和Westernblotting法检测M3R的表达,MTT法和Boydenchamber法分别检测胆碱受体激动剂碘化乙酰胆碱(ACh)及M3R拮抗剂4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidinemethiodide(4-DAMP)对SBC3细胞增殖和迁移的影响。结果:SBC3和H82细胞均表达M3R,SBC3细胞M3R蛋白相对表达强度是H82细胞的2.65倍。ACh浓度依赖性地刺激SBC3细胞增殖,10-4和10-3mol/LACh在48h和72h作用明显(P＜0.01)。4-DAMP浓度依赖性地阻断ACh对细胞增殖的刺激作用,48h时,10-5mol/L4-DAMP阻断ACh的作用(P＜0.05),至72h,10-7、10-6mol/L(P＜0.05)和10-5mol/L(P＜0.01)4-DAMP都能阻断ACh的作用。无外源性ACh的情况下,10-6、10-5mol/L4-DAMP在48h都能明显地抑制细胞增殖(P＜0.01),在72h,10-5mol/L4-DAMP的作用(P＜0.01)强于10-6mol/L4-DAMP(P＜0.05)。ACh浓度依赖性地增强SBC3细胞向人纤维结合蛋白(Fn)的迁移,10-4mol/LACh增加细胞迁移约3倍,10-6、10-5mol/L4-DAMP几乎完全阻断10-4mol/LACh刺激的SBC3细胞迁移(P＜0.01)。结论:人SCLC细胞表达M3R,M3R拮抗剂抑制SCLC细胞增殖和迁移。