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大鼠骨髓间充质干细胞分离与培养:第3代细胞增殖快纯度高
作者姓名:曾智谋,  范忠诚,  张寿,  刘亦恒,  吴多庆,  王琮仁
作者单位:[1]成都医学院第一附属医院脊柱外科,四川省成都市610500; [2]中南大学湘雅医学院附属海口医院骨科中心,海南省海口市570208
基金项目:海口市重点科技项目(2011-0135,2014-082); 海口市人民医院院内课题(2014-YQY-07)
摘    要:
背景:进行组织工程研究的首要环节是培养出大量生物活性好、增殖速度快、细胞纯度高的种子细胞。目的:分析全骨髓贴壁法培养大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性。方法:采用全骨髓贴壁法分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞,绘制第3代细胞生长曲线,观察各代细胞形态学变化,流式细胞分析法测定第2代、第3代细胞表面标志物(CD29、CD90、CD34、CD45)的表达。结果与结论:经全骨髓贴壁法培养3代以内骨髓间充质干细胞均具有典型成纤维样细胞形态而且贴壁生长;第2代骨髓间充质干细胞表型CD29、CD90、CD34、CD45表达分别为91.5%,96.2%,1.3%,8.0%,第3代骨髓间充质干细胞分别为98.2%,98.1%,0.6%,2.0%;细胞生长曲线结果表明,以细胞浓度8×107L-1接种,细胞增殖速度快,获得的细胞总数多。综合形态学及细胞鉴定结果,第3代大鼠骨髓间充质干细胞活性好、增殖速度快、细胞纯度高,适合作为组织工程研究的种子细胞。

关 键 词:骨髓  间质干细胞  细胞培养技术  细胞,培养的  干细胞  骨髓干细胞  骨髓贴壁法  细胞培养  形态学  生长曲线  鉴定
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