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survivin的siRNA靶向干扰膀胱癌的实验研究
引用本文:侯建全,何军,温端改,王小林.survivin的siRNA靶向干扰膀胱癌的实验研究[J].中华医学遗传学杂志,2007,24(4):401-404.
作者姓名:侯建全  何军  温端改  王小林
作者单位:1. 215006,苏州大学附属第一医院泌尿外科
2. 215006,江苏省血液研究所
基金项目:江苏省重点人才基金(RC2003094);江苏省卫生厅科技基金(H200517);江苏省六大高峰人才项目(06-B-021);江苏省科技厅社会发展基金(BS2005620)
摘    要:目的实验研究靶向转染survivin的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对膀胱癌生物学行为的影响。方法设计1对survivin编码基因序列特异的siRNA,用脂质体转染T24膀胱癌细胞株。采用流式细胞术检测转染效率和细胞凋亡;荧光实时定量PCR检测干扰前后survivin的mRNA表达;用survivin的siRNA片段插入空载体后建立重组载体pRNAT-U6、1/Neo-survivin。结果脂质体转染T24细胞后的转染效率为92.3%;survivin编码基因序列特异的siRNA能有效下调survivin基因的表达,呈时间和剂量依赖性,最大效应浓度为100nmol/L,此时survivin表达水平下调了75.91%,并显著地抑制了细胞生长,抑制率达55.29%,差异有统计学意义(P〈0.01);细胞凋亡率亦增至45.70%,与对照相比差异有统计学意义(P〈0.01)。用限制性内切酶将空载体线性化,T4DNA连接酶将siRNA片段插入空载体中,对该重组表达载体进行鉴定,获得RNA干扰质粒载体pRNAT-U6.1/Neo-survivin。结论siRNA.survivin能显著下调膀胱癌细胞survivin基因表达水平,促进细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖,可能成为膀胱癌基因治疗的新工具。成功构建的靶向survivin基因表达的RNA干扰质粒载体为进一步应用RNA干扰技术进行survivin基因功能研究奠定了基础。

关 键 词:survivin基因  小分子干扰RNA  膀胱癌  遗传载体
修稿时间:2006-08-22

Experimental study on bladder cancer by the small interfering RNA targeting survivin
HOU Jian-quan,HE Jun,WEN Duan-gai,WANG Xiao-lin.Experimental study on bladder cancer by the small interfering RNA targeting survivin[J].Chinese Journal of Medical Genetics,2007,24(4):401-404.
Authors:HOU Jian-quan  HE Jun  WEN Duan-gai  WANG Xiao-lin
Institution:Department of Urology, First Affdiated Hospital of Soochow University, Suzhou, Jiangsu, 215006 P.R. China;Jiangsu Institute of Hematology, First Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou, Jiangsu, 215006 P. R, China
Abstract:
Keywords:survivin gene  small interfering RNA  bradder neoplasms  genetic vector
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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