腺病毒介导的HSV—tk／GCV自杀基因系统靶向性治疗前列腺癌的实验研究

目的：观察腺病毒介导单纯疱疹病毒胸苷激酶基因，丙氧鸟苷（HSV—tk／GCV）自杀基因系统在人端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子调控下对人前列腺癌细胞的靶向性体外杀伤效应。方法：利用不同感染复数（MOI）的重组腺病毒携带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因感染前列腺癌细胞LNCaP和人成纤维细胞MRC-5，荧光显微镜下观察其感染效率：利用携带不同启动子的重组腺病毒Ad—hTERT-HSV／TK以及Ad—CMV—HSV／TK感染LNCaP和MRC-5细胞，加入不同浓度GCV，MTY法观察受转染细胞的存活率。结果：重组腺病毒Ad—hTERT—EGFP能特异地转染LNCaP，其转染效率随重组病毒的MOI增加而升高（P〈0．01），MOI为1时转染率为8．3％，MOI为1000时转染率达100％；应用GCV处理后，Ad—CMV—HSV／TK对LNCaP和MRC-5细胞均有杀伤作用，而Ad—hTERTp—HSV／TK只杀伤LNCaP（P〈0．001），随着MOI和GCV浓度的增加，LNCaP细胞存活率明显降低（P〈0．01），MOI为1和GCV浓度为1μmol/L时存活率为95．4％。MOI为100和GCV浓度为1000μmol／L时存活率仅为6．1％，并有旁观者效应。结论：重组腺病毒携带EGFP报告基因可准确、简便地确定转染效率；hTERT启动子调控的重组腺病毒介导的HSV—tk／GCV自杀基因系统对人前列腺癌细胞有靶向杀伤作用。

The selective killing effect of HSV-TK/GCV suicide gene system mediated by adenovirus on prostate cancer cells