应用弹性蛋白酶诱导构建新型慢性阻塞性肺疾病合并骨质疏松症的动物模型

目的：建立并评价弹性蛋白酶诱导小鼠慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）合并骨质疏松症模型。方法：24只健康雌性8周龄C57BL/6小鼠（重约18 g）随机分为3组，对照组予以气管内滴注生理盐水，实验1组和实验2组气管内滴注弹性蛋白酶，对照组和实验1组继续饲养8周后处死，实验2组继续饲养12周后处死。HE染色评估对照组和实验组小鼠肺组织与胫骨组织病理学改变。ELISA检测支气管肺泡灌洗液与血清相关炎症因子含量。Micro-CT检测小鼠股骨骨量相关参数。实时荧光定量PCR实验检测破骨与成骨相关基因表达情况。结果：肺组织病理显示实验组肺泡结构紊乱，肺泡壁变薄或断裂，肺泡腔扩大。肺泡灌洗液炎症因子IL-6与TNF-α较对照组明显升高（P<0.001），血清炎症因子IL-1β与TNF-α较对照组明显上升（P<0.001）。实验组BV/TV （骨体积分数）、Tb.Th （平均骨小梁厚度）与Tb.N （平均骨小梁数）较对照组均明显降低（P<0.05），实验组Tb.Sp （平均骨小梁分离度）和BS/BV （骨表面积分数）较对照组明显增加（P<0.01）。与对照组相比，实验组小鼠胫骨组织破骨相关标志基因表达增加（P<0.05），成骨相关标志基因表达下降（P<0.05）。实验1组与实验2组结果均呈时间依赖。结论：该研究应用弹性蛋白酶成功构建COPD合并骨质疏松症模型，为今后探究COPD合并骨质疏松症的发病机制提供合适的动物模型。

Establishment of a novel mouse mode of elastase-induced chronic obstructive pulmonary disease related osteoporosis