AP1反应元件的确定及在细胞角蛋白13基因表达调控中的作用 |
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引用本文: | 林功标,肖健云,赵素萍,田勇泉,王承龙,邱元正.AP1反应元件的确定及在细胞角蛋白13基因表达调控中的作用[J].中华医学遗传学杂志,2002,19(6):479-483. |
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作者姓名: | 林功标 肖健云 赵素萍 田勇泉 王承龙 邱元正 |
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作者单位: | 1. 350005,福州,福建医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科 2. 410008,长沙,中南大学湘雅医院耳鼻咽喉科 |
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基金项目: | 卫生部科技专项基金 (WKZ- 2 0 0 2 - 1 - 1 2 ),湖南省自然科学基金 (99JJY2 0 0 34)~~ |
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摘 要: | 目的 确定细胞角蛋白13(cytokeratin 13,CK13)基因5'旁侧-nt,199--nt.192碱基CTGAATCA反应元件的类型及其在CK13基因表达调控中的作用。方法 采用报告基因分析的,构建CK13基因5'旁侧513bp全片段,-nt.207- nt.63与氯霉素乙酰转移酶报告基因增强子载体的重组体,并采用PCR定点诱变技术,构建与-nt.207 nt.63同样长短,但-nt.197和T、G分别定点诱变为A,T的氯霉素乙酰转移酶报告基因增强子载体的重组体,通过脂质体介导的转染技术导入HeLa细胞,检测各重组体报告基因的瞬间表达,确定CK13基因5'旁侧-nt.199--nt.192碱基CTGAATCA在CK13基因表达调控中的作用;并采用凝胶滞留试验及竞争性凝胶滞留试验验证CK13基因5'旁侧中CTGAATCA反应元件的类型。结果 凝胶滞留试验及竞争性凝胶滞留试验证实CK13基因5'旁侧中CTGAATCA反应元件的类型。结果 凝胶滞留试验及竞争性凝胶滞留试验证实CK13基因5'旁侧-nt.199--nt.192碱基CTGAATCA反应元件是AP1反应元件,它促进CK13基因的表达。结论 CK13基因5'旁侧起始密码上游-nt.199--nt.192的碱基CTGAATCA是AP1反应元件,而不是cAMP反应元件,它可增强CK13基因5'旁侧的转录活性。
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关 键 词: | 细胞角蛋白13基因 AP1反应元件 基因表达调控 |
修稿时间: | 2002年1月30日 |
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