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3-甲基腺嘌呤诱发HeLa细胞自噬及抑制辐照细胞自噬的双重作用
作者姓名:杨艳丽  刘玲  王豫  刘晓丹  周平坤
作者单位:[1]南华大学公共卫生学院环境医学与放射卫生研究所,衡阳421001 [2]军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京100850
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31370843)
摘    要:
目的了解PI,K抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对电离辐射后细胞自噬的影响,初步探讨作用机制。方法细胞增殖-毒性试剂盒CCK-8检测不同浓度3-MA处理及60Coγ射线4Gy照射或联合3-MA作用的HeLa细胞细胞生长变化和毒性,Annexin V—FITC/PI双标记检测细胞凋亡,Westernblot检测自噬相关蛋白SQSTMl/p62表达,Lipofectamine2000介导转染GFP—LC3质粒,共聚焦显微镜检测自噬体形成。结果3mmol/L以上浓度3-MA作用24h对HeLa细胞增殖有明显的抑制作用,作用更长时间产生致死毒性效应。无论是5mmol/L3-MA单独作用还是单独4Gy照射,均能诱发HeLa细胞自噬。但3-MA与(射线辐照联合作用时,HeLa细胞自噬受到抑制,细胞凋亡显著增加。结论PI3K抑制剂3-MA既诱发细胞自噬又能抑制电离辐射诱发细胞自噬,以在不同的条件下两种方式影响细胞存活。

关 键 词:3-甲基腺嘌呤  细胞自噬  细胞凋亡  细胞存活
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