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端粒酶催化亚单位基因启动子调控Hsv-tk/GCV系统对肺癌细胞A549选择性杀伤作用的研究
引用本文:唐小军,王艳萍,周清华,车国卫,陈小禾,朱大兴. 端粒酶催化亚单位基因启动子调控Hsv-tk/GCV系统对肺癌细胞A549选择性杀伤作用的研究[J]. 中华医学遗传学杂志, 2007, 24(2): 148-152
作者姓名:唐小军  王艳萍  周清华  车国卫  陈小禾  朱大兴
作者单位:1. 泸州医学院附属医院胸心外科
2. 610041,成都,四川大学华西医院肿瘤分子诊断研究室
3. 610041,成都,四川大学华西医院胸心外科
4. 610041,成都,四川大学华西医院干细胞与组织工程研究室
基金项目:国家自然科学基金(30270589,30470762)~~
摘    要:
目的研究人端粒酶催化亚单位(human telomerase catalytic subunit,hTERT)基因启动子调控单纯疱疹胸苷激酶/更昔洛韦(herpes simplex virus-thymidine kinase/ganciclovir,Hsv-tk/GCV)治疗系统对人肺癌细胞株A549的选择体外杀伤作用。方法(1)用脂质体法将hTERT启动子和sv40启动子调控的tk基因表达质粒(pGL3-hTp-tk和pGL3-sv40-tk)转染端粒酶阳性的人肺腺癌细胞株A549及端粒酶阴性的人胚肺成纤维细胞株MRC-5,用逆转录-PCR方法检测转染细胞中tk基因的表达情况;(2)用MTT法检测GCV对上述转染细胞体外增殖的抑制作用;(3)用流式细胞仪检测GCV对上述转染细胞凋亡和细胞周期的影响。结果(1)转染pGL3-sv40-tk的细胞A549、MRC-5和转染pGL3-hTp-tk的A549均有tkmRNA表达,转染pGL3-hTp-tk的MRC-5无tkmRNA表达;(2)GCV对转染pGL3-sv40-tk的细胞A549、MRC-5和转染pGL3-hTp-tk的A549体外增殖均有明显抑制作用,对转染pGL3-hTp-tk的MRC-5无明显抑制作用;(3)转染pGL3-sv40-tk的A549、MRC-5和转染pGL3-hTp-tk的A549细胞,GCV处理后细胞凋亡指数(21.58%、9.35%和23.19%)均显著高于转染pGL3-hTp的A549和MRC-5细胞(0.78%和0.55%)及空白对照A549和MRC-5细胞(2.17%和0.60%),转染pGL3-hTp-tk的MRC-5细胞凋亡指数(0.88%)无明显升高。结论hTERT启动子调控Hsv-tk基因可以在肺癌细胞中选择性表达,hTERT调控的Hsv-tk/GCV治疗系统对肺癌细胞体外增殖具有靶向性抑制作用。

关 键 词:肺癌  自杀基因  端粒酶催化亚单位  选择性表达
修稿时间:2006-09-21

A study on selective killing effect of Hsv-tk/GCV driven by human telomerase catalytic subunit promoter on human lung cancer cell A549
TANG Xiao-Jun,WANG Yan-ping,ZHOU Qing-hua,CHE Guo-wei,CHEN Xiao-he,ZHU Da-xing. A study on selective killing effect of Hsv-tk/GCV driven by human telomerase catalytic subunit promoter on human lung cancer cell A549[J]. Chinese journal of medical genetics, 2007, 24(2): 148-152
Authors:TANG Xiao-Jun  WANG Yan-ping  ZHOU Qing-hua  CHE Guo-wei  CHEN Xiao-he  ZHU Da-xing
Affiliation:1. Department of Thoracocardiosurgery, West China Hospital, Sichuan University, Chengdu, Sichuan, 610041 P. R. China. ; 2. Laboratory of Molecular Diagnosis of Cancer , West China Hospital, Sichuan University , Chengdu, Sichuan, 610041 P.R. China ; 3. Division Stem CeUs and Tissue Engineering, Sichuan University, Chengdu, Sichuan, 610041 P. R. China
Abstract:
Keywords:lung cancer  suicide gene  human telomerase catalytic subunit  selective expression
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