| 摘 要： | 目的研究紫草素对人结肠癌细胞系 SNU?407增殖和自噬的影响,及其潜在的分子机制。方法通过细胞计数试剂盒 ? 8(CCK?8)检测细胞存活率,用 Hoechst 33258染色法和流式细胞术分析细胞生长情况,采用蛋白质印迹法(Western Blot)分析不同紫草素浓度(0μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L和 30 μmol/L)处理前后自噬相关的 E1连接酶 7(ATG7)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和死亡受体(Caspase?8,Caspase?3,PARP)蛋白表达情况。结果紫草素以时间和剂量依赖性方式诱导 SNU?407细胞凋亡和自噬,在紫草素处理的 SNU?407细胞中观察到 ATG7表达水平显著升高;与 0 μmol/L的紫草素相比, 10 μmol/L、20 μmol/L和 30 μmol/L紫草素处理后 SNU?407细胞的 ATG7/自噬相关的 E1连接酶 5(ATG5)相对表达量分别显著增加［(176±9)%、(212±13)%和(293±11)%］。与 GFPi(阴性对照质粒 pSUPER_GFP siRNA)阴性对照组相比, ATG被沉默的 shATG7(ATG7的 RNA干扰质粒 pSUPER_ATG7 siRNA)组 LC3?Ⅱ/LC3?Ⅰ比值显著低于 GFPi阴性对照组［(8.25±1.36)比(97.45±1.98),P＜0.001］ATG7沉默后抑制了紫草素诱导的 SNU?407细胞自噬;荧光显微镜结果和流式细胞术分析证实紫草素诱导结肠癌细胞凋亡;质印迹法印迹分析显示紫草素通过 MAPK活化诱导结肠癌细胞凋亡,激活死亡受体(FADD)调节细胞凋亡蛋白(Caspase?8,Caspase?3,PARP)表达。此外,紫草素通过增加 ATG7的表达水平,进而下调促进细胞自噬的 p62表达。结论紫蛋白,草素通过激活 ATG7信号通路诱导人结肠癌细胞系 SNU?407细胞凋亡和自噬。
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