大劣按蚊Torso-like基因鉴定 分子结构及表达特征

目的　鉴定大劣按蚊Torso?like（tsl）基因及表达特征，为深入研究tsl基因功能提供理论基础。方法　根据黑腹果蝇和冈比亚按蚊tsl基因，检索大劣按蚊全基因组并鉴别大劣按蚊tsl基因，设计特异性引物，并采用PCR和逆转录PCR技术扩增目的基因。利用生物信息学软件分析tsl基因编码TSL蛋白的理化性质、信号肽、跨膜结构、蛋白质二级结构和三级结构，并进行系统发育进化分析。利用实时荧光定量PCR技术检测该基因在大劣按蚊各组织中的表达水平。结果　大劣按蚊tsl基因全长16 751 bp，CDS区长1 134 bp，编码377个氨基酸。TSL蛋白属于亲水性稳定蛋白。经生物信息学预测，TSL蛋白为位于膜外的分泌蛋白，且包含信号肽；其二级结构含α?螺旋（51.72%）、延伸链（12.20%）、β?折叠（4.78%）和无规则卷曲（31.30%），且能以5cj9.1.A为模板进行3D同源建模。系统发育进化分析发现大劣按蚊TSL蛋白与法老按蚊TSL蛋白亲缘关系较近。实时荧光定量PCR检测显示，tsl基因在大劣按蚊头、胸、腹、足均有表达，且在头部表达量最高、足部表达量较低。结论　本研究从基因组水平鉴定了大劣按蚊tsl基因，分析了其蛋白结构及组织特异性表达特征，为进一步深入研究该基因功能奠定了基础。