MyD88 RNA干扰抑制小鼠骨髓树突状细胞成熟的实验研究

目的：针对小鼠骨髓树突状细胞（DC）髓性分化因子88（MyD88）,采用RNA干扰技术抑制其合成,观察脂多糖（LPS）刺激后DC生物学活性的变化,探讨获得耐受性DC的方法,为DC的临床应用提供新思路和理论依据。方法：培养小鼠骨髓源性DC,分为对照组、LPS组及RNA干扰组,对照组不予任何处理,LPS组加入终浓度为1μg/ml的LPS,RNA干扰组于加入MyD88 siRNA12小时后给予1μg/mlLPS刺激,继续培养3天。免疫细胞化学检测DCMyD88、核因子-κB（NF-κB）的表达,Western blot检测DCMyD88的表达;流式细胞术检测DC细胞表面CD80、CD86及MHC-Ⅱ分子的变化,ELISA法检测各组DC分泌TNF-α。IFN-γ和IL-12的浓度,混合淋巴细胞培养检测T细胞增殖能力。结果：LPS促进DC高表达CD80、CD86及MHC-Ⅱ分子,促进Th1型细胞因子释放、MyD88高表达及NF-κB核移位,并诱导T细胞增殖,MyD88 siRNA可阻断LPS的这些效应。结论：MyD88 siRNA可抑制DC成熟,产生耐受性DC,增强同种未成熟DC的免疫耐受诱导作用,为进一步研究DC的临床应用奠定了基础。

Inhibition effect of MyD88 siRNA to the activation of dendritic cells from murine bone marrow