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小鼠β-防御素2肿瘤疫苗的构建及特性鉴定
引用本文:马小彤,徐玢,董成亚,石洋,林永敏,吴克复.小鼠β-防御素2肿瘤疫苗的构建及特性鉴定[J].中国免疫学杂志,2007,23(8):675-679.
作者姓名:马小彤  徐玢  董成亚  石洋  林永敏  吴克复
作者单位:中国医学科学院,中国协和医科大学血液学研究所血液病医院,实验血液学国家重点实验室,天津,300020
基金项目:国家自然科学基金;天津市自然科学基金
摘    要:目的:构建分泌性小鼠β-防御素2(MBD2)真核表达质粒,转染L1210淋巴细胞白血病细胞,对转染细胞进行功能及特性鉴定。方法:RT-PCR法从小鼠皮肤细胞克隆MBD2成熟部分基因片段,用overlap PCR法将小鼠Igκ信号肽与MBD2成熟片段相连,构建MBD2分泌表达载体。经测序证实序列正确后,脂质体法转染L1210细胞,筛选稳定表达细胞株。RT-PCR、Western blot检测瘤苗MBD2的表达。Transwell法检测瘤苗分泌的MBD2对不成熟树突状细胞(iDC)迁移的作用。细胞计数、PI染色及FACS观察转染MBD2对肿瘤细胞增殖、细胞周期及MHCⅠ类(H-2K^d,H-2D^d)、Ⅱ类(I-A^d)分子及共刺激分子(CD80、CD860)表达的影响。结果:转染MBD2基因的肿瘤细胞表达并分泌MBD2,并以剂量依赖方式趋化iDC,表明具有生物学活性。转染MBD2基因对肿瘤细胞生长增殖、细胞周期及细胞表面MHC分子及共刺激分子表达无明显影响。结论:本实验成功构建了MBD2白血病细胞疫苗,为进一步体内评价抗白血病效果奠定了基础。

关 键 词:防御素  天然免疫  瘤苗  急性淋巴细胞白血病
文章编号:1000-484X(2007)08-0675-05
修稿时间:2007-04-28

Construction and charactization of a murine β-defensin 2 tumor vaccine
MA Xiao-Tong,XU Bin,DONG Cheng-Ya,SHI Yang,LIN Yong-Min,WU Ke-Fu.Construction and charactization of a murine β-defensin 2 tumor vaccine[J].Chinese Journal of Immunology,2007,23(8):675-679.
Authors:MA Xiao-Tong  XU Bin  DONG Cheng-Ya  SHI Yang  LIN Yong-Min  WU Ke-Fu
Institution:National Laboratory of Experi- mental Hematology, Institute of Hematology and Blood Diseases Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences, Peking Union Medical College, Tianjin 300020, China
Abstract:
Keywords:Defensin  Innate immunity  Tumor vaccine  Lymphocytic leukemia
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