| pCAG⁃3×flag⁃PP2A Cα转基因小鼠构建及高表达系的筛选 |
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| 作者姓名： | 周建丽 赖娅娜 李树珍 曾文滔 |
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| 作者单位： | 南京医科大学医药实验动物中心，医药模式动物重点实验室，江苏 南京 211166,南京医科大学医药实验动物中心，医药模式动物重点实验室，江苏 南京 211166,南京医科大学医药实验动物中心，医药模式动物重点实验室，江苏 南京 211166,南京医科大学医药实验动物中心，医药模式动物重点实验室，江苏 南京 211166 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31171443） |
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| 摘 要： | 目的：构建过表达pCAG?3×flag?PP2A Cα转基因小鼠，筛选高表达稳定遗传系，建立PP2A Cα基因相关功能研究模型动物。方法：将Flag蛋白标签序列与鼠源PP2A Cα cDNA 转录本设计成融合基因，插入CAG启动子下游，构建过表达载体pCAG?3×flag?PP2A Cα。通过原核显微注射技术，将线性化pCAG?3×flag?PP2A Cα质粒注射入受精卵雄原核，构建pCAG?3×flag?PP2A Cα过表达模型小鼠，PCR筛选阳性过表达小鼠。提取阳性过表达小鼠组织总蛋白，在蛋白质水平分析转基因小鼠3×flag?PP2A Cα的表达。结果：PCR 鉴定及测序结果证实，pCAG?3×flag?PP2A Cα 转基因载体及过表达pCAG?3×flag?PP2A Cα 转基因小鼠模型构建成功。Western blot筛选转基因高表达系小鼠。结论：筛选得到pCAG?3×flag?PP2A Cα高表达稳定遗传系小鼠。
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| 关 键 词： | pCAG?3×flag?PP2A Cα；转基因小鼠；过表达 |
| 收稿时间： | 2017-03-30 |
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