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大肠杆菌分泌表达重组水蛭素Ⅲ的新方法研究
引用本文:黄翠翠,吕静,吴梧桐,谭树华,王鑫. 大肠杆菌分泌表达重组水蛭素Ⅲ的新方法研究[J]. 东南大学学报(医学版), 2011, 30(6): 877-882. DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2011.06.013
作者姓名:黄翠翠  吕静  吴梧桐  谭树华  王鑫
作者单位:中国药科大学,生命科学与技术学院,江苏,南京,210009
基金项目:国家“十一五”科技重大专项资助项目(No.2009ZX09103-653); 江苏省“六大人才高峰”(第六批)资助项目(20090306)
摘    要:
目的:在已有的分泌表达载体pTASH基础之上构建一种更为高效的新型大肠杆菌分泌表达载体,并检验其分泌表达水平是否提高。方法:提取原始质粒pTASH作为模板,用PCR扩增重组水蛭素基因表达盒片段以后,再插入到原表达载体pTASH的BamHⅠ位点上,从而产生含有两个串联的水蛭素基因表达盒单元的质粒p(TASH)2,转入大肠杆菌进行摇瓶表达。结果:双表达盒菌种p(TASH)2进行摇瓶水平的培养,其上清液抗凝血酶活性可达3 500 ATU.ml-1。结论:与单表达盒质粒pTASH的表达水平(2 000 ATU.ml-1)相比,双表达盒质粒p(TASH)2的摇瓶表达水平显著提高。

关 键 词:大肠杆菌  重组水蛭素Ⅲ  分泌表达  双表达盒

A new method of secretion and expression of rHV3 in E.coli
HUANG Cui-cui,LU Jing,WU Wu-tong,TAN Shu-hua,WANG Xin. A new method of secretion and expression of rHV3 in E.coli[J]. Journal of Southeast Univ: Medical Sci Ed, 2011, 30(6): 877-882. DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2011.06.013
Authors:HUANG Cui-cui  LU Jing  WU Wu-tong  TAN Shu-hua  WANG Xin
Affiliation:HUANG Cui-cui,Lü Jing,WU Wu-tong,TAN Shu-hua,WANG Xin(School of Life Science and Technology,China Pharmaceutical University,Nanjing 210009,China)
Abstract:
Keywords:Escherichia coli  recombinant hirudin  secreting expression  dual expression cassette  
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