低氧微环境对小鼠皮肤成纤维细胞HIF-1、Oct4、Uhrf1表达的影响

目的探讨低氧条件下小鼠皮肤成纤维细胞内低氧调节关键转录因子HIF-1、多潜能转录因子Oct4及表观遗传调控因子Uhrf1的表达,为低氧微环境影响细胞重编程效率的机制研究奠定基础。方法将体外培养的小鼠皮肤成纤维细胞分为低氧(2%O_2+5%CO_2+93%N_2)6h、12h、24h、48h组和常氧(20%O_2+5%CO_2)对照组。用免疫荧光化学方法和RT-PCR检测小鼠皮肤成纤维细胞中HIF-1,Oct4和Uhrf1的表达,在蛋白和m RNA水平对其进行分析。结果成纤维细胞内HIF-1、Oct4、Uhrf1蛋白的阳性表达率随着低氧时间的延长逐渐增多,常氧组均未见表达。低氧6h、12h、24h组m RNA表达量均比常氧组高,但差异不显著(>0.05);而低氧48h组三个基因m RNA表达明显高于常氧组(<0.01)。结论低氧微环境HIF-1,Oct4和Uhrf1在成纤维细胞内表达水平上调,提示它们在其中发挥了重要作用。