| His标签单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用 |
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| 作者姓名： | 王文礼 王云龙 李晨阳 陈小科 刘利锋 |
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| 作者单位： | 1. 河南师范大学,河南,新乡,453007;河南省生物工程技术研究中心,河南,郑州,450002
2. 河南省生物工程技术研究中心,河南,郑州,450002;郑州职业技术学院,河南,郑州,450121
3. 北京协和医院,北京,100730 |
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| 摘 要： | 目的:制备和鉴定抗His标签单克隆抗体(mAb),初步建立检测和纯化带His标签融合蛋白的方法.方法:用碳化二亚胺法合成His-tag完全抗原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术进行细胞融合,通过有限稀释法和间接ELISA法克隆和筛选阳性杂交瘤细胞株.常规制备腹水,用辛酸-硫酸铵法纯化,并对纯化的mAb进行特异性鉴定.结果:His-tag完全抗原偶联成功,经细胞融合、筛选及克隆化,成功获得1株分泌His标签mAb的杂交瘤细胞株.制备腹水测得腹水效价高于 1:106,且此株mAb与其他融合蛋白标签无交叉反应,并在含His标签融合蛋白的鉴定实验中取得了满意效果.结论:成功制备了1株His标签mAb,为带His标签融合蛋白的研究应用提供了重要的工具.
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| 关 键 词： | His标签 单克隆抗体 蛋白印迹 标签 单克隆抗体 应用 研究 效果 实验 交叉反应 融合蛋白 水效 克隆化 偶联 结果 特异性鉴定 酸铵法 腹水 杂交瘤细胞株 阳性 筛选 ELISA 有限稀释法 |
| 文章编号： | 1007-8738(2008)04-0399-02 |
| 修稿时间： | 2007-12-19 |
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