|
|||||
|
|
| PD-L2剪切异构体与EGFP融合蛋白的表达及其亚细胞定位研究 | |
| 引用本文： | 何贤辉,徐丽慧,曾耀英,刘毅,蔡小嫦. PD-L2剪切异构体与EGFP融合蛋白的表达及其亚细胞定位研究[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2004, 24(11): 878-882 |
| 作者姓名： | 何贤辉 徐丽慧 曾耀英 刘毅 蔡小嫦 |
| 作者单位： | 1. 510632,广州,暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室 2. 510632,广州,暨南大学生物工程研究所 3. 郑州大学第一附属医院皮肤科 4. 510632,广州,暨南大学第一附属医院皮肤科 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目 ( 3 0 2 3 0 3 5 0 )，面上项目( 3 0 3 7165 1)，国家重点基础研究发展规划项目 (G19990 5 43 0 3和G2 0 0 0 5 70 0 6)，广东省“十五”科技计划重大专项基金 (A3 0 2 0 2 0 2 0 4)资助 |
| 摘 要： | 目的 探讨PD L2的剪切异构体在哺乳动物细胞的表达和亚细胞定位。方法 以RT PCR方法克隆人PD L2基因的常规剪切体和新型剪切异构体的cDNA ,构建其与EGFP融合的表达载体 ,分别转染K5 6 2细胞进行表达 ,经抗PD L2抗体染色后以流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分析融合蛋白的表达及其亚细胞定位。结果 从活化的人白细胞中克隆到常规剪切体PD L2Ⅰ和新型剪切异构体PD L2Ⅱ的cDNA ,后者删除了编码胞外区Ig C结构域的外显子 3。进而构建了PD L2Ⅰ EGFP和PD L2Ⅱ EGFP融合蛋白表达载体 ,分别转染K5 6 2细胞。流式细胞仪分析显示 ,转染前者的细胞中既可检测到EGFP的表达又可在细胞膜上检测到PD L2表达 ;而转染后者的细胞中只能检测到EGFP的表达 ,在其细胞膜上不能检测到PD L2表达。共聚焦显微镜观察显示 ,PD L2Ⅰ EGFP主要分布于细胞膜表面 ,PD L2Ⅱ EGFP则主要分布于细胞内。结论 常规剪切体PD L2Ⅰ能正确定位于细胞膜表面 ,而新型剪切异构体PD L2Ⅱ则位于细胞内 ,不能运输至细胞膜 ,提示不同PD L2剪切异构体可能与其功能的调变有关 |
| 关 键 词： | PD-L2 剪切异构体 绿色荧光蛋白 融合蛋白 K562细胞 |
| 修稿时间： | 2004-01-20 |
Expression of the fusion proteins of PD-L2 splice isoforms with EGFP and its subcellular localization |
|
| HE Xian-hui,XU Li-hui,ZENG Yao-ying,LIU Yi,CAI Xiao-chang. Key Laboratory of Tissue Transplantation and Immunology,Ministry of Education,Guangzhou ,China[. Expression of the fusion proteins of PD-L2 splice isoforms with EGFP and its subcellular localization[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2004, 24(11): 878-882 | |
| Authors: | HE Xian-hui XU Li-hui ZENG Yao-ying LIU Yi CAI Xiao-chang. Key Laboratory of Tissue Transplantation Immunology Ministry of Education Guangzhou China[ |
| Affiliation: | HE Xian-hui~*,XU Li-hui,ZENG Yao-ying,LIU Yi,CAI Xiao-chang. ~*Key Laboratory of Tissue Transplantation and Immunology,Ministry of Education,Guangzhou 510632,China[ |
| Abstract: | |
| Keywords: | PD-L2 Splice variant Green fluorescent protein Fusion protein K562 cell |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |